Time Polymerase Chain Reaction Analysis of Saliva or Urine Specimens

Обнаружение врожденного Цитомегаловирусной инфекции с помощью вещественно-

Время полимеразной цепной реакции Анализ слюне или моче Особи

 

 

Вирусная культура мочи или слюны была стандартная техника золота для диагностики врожденной цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекционное заболевание. Результаты быстрого культуры и полимеразной цепной реакция (ПЦР) анализ образцов мочи и слюны 80 детей были сравнены, чтобы определить клиническую полезность в режиме реального времени ПЦР для диагностики врожденного CMV инфекционное заболевание. Результаты ПЦР мочи были положительными в 98,8% образцов. Три ПЦР-положительных образцов мочи были   рицательными культуры. Результаты ПЦР слюны и культуры были созвучны в 78 образцов (97,5%). Два ПЦР-положительные образцы слюны культуре негативные. Эти результаты показывают, что ПЦР выполняет а также быстрой культуры мочи или слюны образцов

для диагностики врожденной инфекции и слюны образцы CMV легче собирать. Так как PCR также предлагает более быстрый поворот, вряд ли будет зависеть от хранения и транспортировки

условия, имеет более низкую стоимость, и может быть адаптирован к highthroughput ситуации, она хорошо подходит для целевого тестирования и широкомасштабный скрининг для ЦМВ.

 

С марта 2007 по март 2012 года, 100 332 детей, рожденных в

7 США медицинские центры были обследованы на наличие врожденной ЦМВ-инфекции

как часть NIDCD ЗВОНКИ исследования [2, 3]. Младенцы с

Положительные результаты скрининга ЦМВ ПЦР или путем быстрой культуры.

 

Слюна были предполагать наличие врожденной ЦМВ-инфекции и

были включены в последующие исследования, чтобы подтвердить врожденный инфекцию

и контролировать функцию слуха. За исследуемый период,

были обнаружены 497 детей, чтобы быть положительным ЦМВ на скрининг, и

тех, 462 были включены в последующей компонента из

изучение. С марта 2007 по февраль 2009 года, 4 из

исследование сайтов использовали стерильные ватные шарики, помещенные в подгузнике для сбора

образцов мочи; эти 4 места затем переключился на моче

мешки для сбора проб в течение оставшейся части периода исследования.

Для грудных детей, у которых были собраны образцы мочи с использованием

ватные шарики, скорость ЦМВ-положительных быстрых культур

значительно ниже (56,1% хлопка против 93,4% за мешок;

P <0,0001); Эти 66 детей были исключены из анализа.

Из оставшихся 396 с подтвержденной врожденной инфекции,

80 оба слюне и моче образцов, полученных в течение первых

3 недели жизни, и они составляли исследуемой группы населения.

Письменное информированное согласие было получено от одного из родителей всех

 

Анализы мочи и слюны образцы были получены из

В ходе исследования испытуемые в среднем в течение 16 дней жизни (диапазон, 2-20

дней). Семь субъектов получали противовирусную терапию, но моча и слюна

Образцы были получены до начала лечения.

Результаты ПЦР были положительными в 79 образцах мочи 80 (98,8%;

95% ДИ 93,2% -100,0%), по сравнению с положительными результатами культивирования

в 76 из 80 проб мочи (95% ДИ 87,8% -98,6%). ПЦР и культуры

Результаты были созвучны в 76 образцах (96,3%). диссонанс

результатов наблюдалась в 3-х образцах, которые были положительными по

ПЦР, но отрицательными по культуре (P = 0,688). Один образец мочи

отрицательным по культуре, и в ПЦР (Таблица 1).

Результатом быстрого культура слюны образцов для обнаружения

ЦМВ были положительными для 78 из 80 субъектов (97,5%; 95% ДИ,

91,3% -99,7%), в то время как результаты ПЦР в реальном времени были положительными

для всех 80 субъектов (100%; 95% ДИ 95,5% -100%). согласный

Положительные результаты наблюдались для обоих анализов в 78 субъектах

(97,5%). ПЦР выявлены ЦМВ в образцах слюны от 2-х детей

что испытали недостаток быстрой культуры (таблица 1).

Как моча, по мнению многих, является оптимальным для выборки

обнаружение ЦМВ у новорожденных, сравнение ПЦР и быстрый

культура слюны и мочи образцов проводили. Результаты

ПЦР мочи на цитомегаловирус были положительными в 79 из 80 детей (98,8%;

 

Используя образцы мочи и слюны от А

большая когорта детей с врожденной ЦМВ-инфекции, мы показали,

что ПЦР выполняет, а также быстрой культуры для

обнаружение вируса в моче и слюне образцах.

Сравнение ПЦР мочи с культурой мочи для диагностики

врожденной ЦМВ-инфекции не был хорошо изучен.

Несколько исследований, изучавших роль ПЦР мочи для

диагностика врожденных ЦМВ отчета чувствительности в диапазоне от

93% до 100% [6-8]. В текущем исследовании, с использованием образцов мочи

от младенцев, как известно, инфицированы ЦМВ, обнаружение

ЦМВ последовательно достигается с помощью ПЦР в реальном времени

Assay по сравнению с культурой. Кроме того, существуют несколько исследований

сравнивая ПЦР с культурой для обнаружения ЦМВ в слюне

образцы. Уоррен и др показали, что ПЦР образцов слюны

обнаружен вирус в 89% из 160 образцов, по сравнению с

90% детектируется быстрой культуры [9]. Используя образцы слюны из

младенцы, как известно, имеют врожденную инфекцию, мы показали,

более высокий уровень обнаружения ЦМВ с использованием ПЦР, по сравнению с

быстрая культура.

Соответствие между ПЦР и культуры результатов был высоким

как моча (95%) и слюна (98%) образцов. Дискордантные образцы

с помощью ПЦР положительный, но отрицательный быстрой культуры может быть истолковано

в ложно-положительных результатов ПЦР или ложно-отрицательных результатов культуры.

Так как ПЦР, как правило, более чувствительный метод обнаружения патогена

чем культуры, ложно-положительные результаты могут наблюдаться при

ПЦР. Ложно-положительные результаты ПЦР слюны может быть связано с загрязнением

выделениями половых путей или грудное молоко [10, 11]. Однако,

ЦМВ редко обнаруживается в грудном молоке, прежде чем 2 недели

послеродовой период, а уровни ДНК CMV достигая максимума в течение месяца после того, как

доставка [11]. хранения и транспортировки образцов, а также интервал

между сбором и обработкой образца, может привести к

значительное снижение титра инфекционного вируса, в результате чего

низкий выход для анализов культуры на основе, по сравнению с ПЦР [12].

Из 2-х образцов слюны, которые были отрицательными быстрой культуры, но

положительный результат ПЦР, оба были положительными в ПЦР мочи и мочи

культура. Кроме того, образцы мочи из 3-х младенцев были диссонансом

Результаты испытаний, со всеми положительный результат теста с помощью ПЦР, но отрицательными по

быстрая культура. Все 3 из этих предметов были подтверждены положительными

для ЦМВ методом ПЦР и культуры слюны. Так как все

исследование детей имели положительные результаты скрининга новорожденных и

культуральные-отрицательные образцы, полученные для подтверждения

врожденная ЦМВИ были положительными с помощью ПЦР, разноголосице

между результатами ПЦР и результаты быстрой культуры в

наше исследование более вероятно, представляет собой ложно-отрицательные результаты быстрого культура

а не ложно-положительных результатов ПЦР.

Младенцы с врожденной ЦМВ-инфекции пролил большое количество

Вирус в слюне и моче, что делает оба образца идеально подходят

для обнаружения вируса, но моча традиционно была более

часто используется образец. существуют ограниченные данные о сравнении

2 типами образца для диагностики врожденной ЦМВ. В 28

у детей с врожденной цитомегаловирусной инфекцией, Ямамото и др найдены

что слюна ПЦР было выявлено 24 случая (86%), по сравнению с 26

(93%), обнаруженное с помощью ПЦР мочи [13]. С увеличением размера выборки,

выводы из данного исследования показывают, что вероятность

обнаружение, либо с помощью культуры или ПЦР-амплификации, как высока

или несколько выше для образцов слюны (таблица 1). Результаты слюны

культуры были положительными в более высокой пропорции образцов,

по сравнению с культурой мочи (97,5% против 95,0%), хотя

разница не имеет существенного значения. Результаты ПЦР были положительными

все образцы слюны, по сравнению с 98,8% от результатов ПЦР мочи.

В дополнение к предложению улучшенное обнаружение ЦМВ, слюны

Образцы более легко собраны, чем образцов мочи, что делает

их лучше подходит для любого целевого тестирования или крупномасштабных

скрининг врожденной инфекции CMV.

Это исследование имеет ограничения. протоколы ПЦР для ЦМВ

не были стандартизированы в разных лабораториях;

Таким образом, может быть изменчивость в выполнении различных

ПЦР-протоколы. Включение недавно разработал международный

Стандарты в ЦМВ ПЦР ожидается снижение

изменчивость проведения анализа внутри и между лабораториями

[14]. Праймеры нас

 

 

Sharon F. Chen,

⇐ Предыдущая12131415161718192021Следующая ⇒

Поделиться: