Общие методы изучения вирусов

Общие методы изучения вирусов

 

О присутствии вируса в организме хозяина судят по появлению тех или иных патологических симптомов. 

Готовится суспензия из материала, в котором подозревается наличие вируса, например лизат бактерий, кусочек ткани или биологическая жидкость. Очищенную суспензию вводят подходящему хозяину и анализируют его реакцию, либо добавляют к суспензии чувствительных клеток и высевают на питательную среду (метод «бляшек» или негативных колоний) (слайд 9.49). 

Для статистической характеристики используется понятие «инфекционная единица» - это наименьшее количество вируса, способное в данном опыте вызвать инфекцию. LD₅₀ – 50%-ая летальная доза или число бляшек в культуре клеток.

Титр вирусной суспензии, выраженный числом инфекционных единиц, содержащихся в единице объема, как правило, соответствует числу вирионов (или числу молекул вирусной нуклеиновой кислоты), способных при условиях данного опыта вызвать инфекцию.

Серологические методы. Серология – это раздел иммунологии, изучающий реакции антигена (вируса) со специфическими защитными веществами, антителами, которые находятся в сыворотке крови (слайд 9.50). 

Антитела нейтрализуют действие вируса. Они связываются с определенными антигенными веществами, находящимися на поверхности вирусных частиц и вирус теряет патогенные свойства. 

Для установления уровня (количества) антител в сыворотке или определения типа данного вируса проводится реакция нейтрализации вируса. Ее можно проводить как на животных, так и на культуре клеток.

Минимальную концентрацию сыворотки, содержащей антитела, достаточную для того, чтобы нейтрализовать вирус, не дать ему проявить цитопатическое действие, называют титром сыворотки, нейтрализующей вирус. Эта концентрация может быть выявлена и с помощью метода бляшек. 

Иммуноблотт – применяется в диагностике ВИЧ. Определяются специфические белки: поверхностные (gp120, gp41) и кор.

Метод ПЦР.

 

 

ЛЕКЦИЯ № 10. КЛАССИФИКАЦИЯ ВИРУСОВ

 

10.1. Характеристика классов ДНК- и РНК-вирусов

10.1.1. Вирусы, содержащие двухцепочечную ДНК (класс I)

10.1.2. Вирусы, содержащие одноцепочечную ДНК (класс II)

10.1.3. Вирусы, содержащие двухцепочечную РНК (класс III)

10.1.4. Вирусы, содержащие плюс-РНК цепь (класс IV)

10.1.5. Вирусы, содержащие «минус»- цепь РНК (класс V)

10.1.6. Ретровирусы (класс VI)

10.2. Вироиды

10.3. Прионовые инфекции (слайд 10.3)

 

Характеристика классов ДНК- и РНК-вирусов

 

Вирусы подразделяются на 6 классов по строению нуклеиновой кислоты:

Класс I – вирусы, содержащие двух цепочечную ДНК. 

Класс II – вирусы, содержащие одно цепочечную ДНК. 

Класс III – вирусы, содержащие двух цепочечную РНК.

Класс IV – вирусы, содержащие «плюс»-цепи РНК. 

Класс V – вирусы, содержащие «минус»-цепи РНК. 

           Класс VI            – вирусы, содержащие обратную транскриптазу

(ретровирусы) (слайд 10.4).

 

Вирусы, содержащие двухцепочечную ДНК (класс I)

 

Герпесвирусы. Семейство Herpesviridae. 

Двухнитевая ДНК, икосаэдральный нуклеокапсид, волокнистая оболочка. Значительная часть герпесвирусов способны вызывать острые и латентные инфекции, а также обладает онкогенным потенциалом (слайд

10.5). 

Herpes labialis. Вызывает первичный герпетический гингивостоматит.

Вирус Эпштейна-Барр вызывает инфекционный мононуклеоз – острое инфекционное заболевание, поражающее лимфоидную ткань всего организма. Этот вирус постоянно выделяют из клеток двух видов опухолей человека – лимфомы Беркитта и карциномы носоглотки (слайд 10.6). 

Генитальный герпес. Ветряная оспа, опоясывающий лишай.

Паповавирусы. Семейство Papovaviridae. 

Икосаэдральный капсид, без оболочки, ДНК циклическая, замкнутая, двухнитевая. Средний размер около 45 нм (слайд 10.7). 

Свое наименование паповавирусы группа получила от названий трех вирусов: вируса папилломы, вируса полиомы и вакуолизирующего обезьяньего вируса, тип 40 (SV40). Вызывают папилломы и полиомы у млекопитающих и человека. SV40 иногда заражает клетки человека.

Папилломавирусы (род Papillomavirus) вызывают поражения кожных покровов и слизистых оболочек. Возбудитель передается при контакте через микротравмы на коже. Вирус бородавок человека, как и вирусы папиллом животных, вызывает лишь доброкачественную пролиферацию эпидермиса.

Полиомавирусы (род Polyomavirus) включают группу вирусов, патогенных для животных и человека. Инфицируют почки и головной мозг

(слайд 10.8). 

SV40 – обезьяний вирус – вызывает нефриты. 

Аденовирусы. Семейство Adenoviridae. 

Впервые выделены Роу в 1953 г. из тканей миндалин и аденоидов у детей. Икосаэдральный голый капсид, ДНК линейная, двухнитевая. Средний размер вириона 60-90 нм (слайд 10.9). 

Наиболее часто вызывают ОРВИ, протекающие по типу гриппоподобных поражений; конъюнктивиты, гастроэнтериты. Аденовирусные инфекции человека достаточно широко распространены.

Основные пути передачи – воздушно-капельный и контактный. 

Поксвирусы. Семейство Poxviridae. 

Объединяет крупные и сложные вирусы, разделяемые на подсемейства: Chordopoxvirus (вирусы оспы позвоночных) и Entomopoxvirus (вирусы оспы насекомых). 

Геном – двухнитевая ДНК. Оболочки нет. Частицы вирусов натуральной оспы (variola) и коровьей оспы (vaccinia) имеют вид округленных блоков 250-390 × 200-260 нм. Они состоят из внутреннего тельца, содержащего ДНК, двойного слоя, содержащего белок, эллиптических белковых телец и наружной мембраны. Частицу обвивают плотно прилегающие к ней нити (слайд 10.10).

Эти вирусные частицы очень устойчивы к высыханию и поэтому чрезвычайно инфекционны.

Все стадии размножения поксвирусов происходят только в цитоплазме. Молекулярный вес ДНК таких вирусов больше, чем у любого другого вируса животных, и репродукция данного вируса связана с инициацией активности самых разнообразных ферментов. 

Наиболее важным для человека является вирус натуральной оспы, который вызывает одно из древнейших инфекционных заболеваний. Все поксвирусы имеют общий антиген, поэтому людей вакцинируют вирусом, полученным от коров, который у людей вызывает весьма слабые симптомы болезни (слайд 10.11).

Гепаднавирусы. Семейство Hepadnaviridae. 

В семейство включены икосаэдральные вирусы с оболочкой, ДНК – неполная (с разрывом одной цепи) двухнитевая, кольцевая. 

Типовой род Hepadnavirus, включает возбудителя гепатита В человека. Орган-мишень инфекции – печень, доминирующий симптом – желтуха. олезнь может протекать в осложненной и хронической форме. Вызывает осложнения – цирроз печени (слайд 10.12). 

Вирус гепатита В – основная причина одной из самых распространенных формы рака – первичного рака печени. Особенность вируса гепатита В состоит в том, что сам по себе он не убивает клетки печени. Заболевание является следствием иммунной атаки организма на собственные клетки печени (слайд 10.13).

Пути передачи – парентеральный (через кровь), половой и вертикальный (от матери к плоду), а также бытовые контакты с больным или хроническим носителем инфекции. Для детей гепатит В представляет особенную опасность, так как будучи перенесенным в раннем возрасте, он в 50-95% случаев переходит в хроническую форму. 

 

Вирусы, содержащие одноцепочечную ДНК (класс II)

 

Парвовирусы. Семейство Parvoviridae. 

Мелкие вирусы, без оболочки. Икосаэдральный капсид, ДНК однонитевая. Диаметр около 20 нм. Геном представлен одноцепочечной ДНК с молекулярным весом всего 1, 5× 10⁶ дальтон. Размножение, по-видимому, полностью зависит от соответствующих систем клетки-хозяина (слайд 10.14). 

Существует два основных класса парвовирусов – автономные и дефектные. Все до сих пор известные автономные парвовирусы – это вирусы грызунов; для транскрипции, репликации и других функций эти вирусы используют соответствующие ферменты клетки-хозяина. Дефектные парвовирусы – «аденоассоциированные» – размножаются лишь в клетках, которые заражены одновременно аденовирусом вирусами (слайд 10.15).

Парвовирусы вызывают аномалии развития у эмбрионов и дефекты растущих тканей у новорожденных. Они вызывают также нарушения функции кишечника. К парвовирусам относится возбудитель инфекционной эритемы (слайд 10.16).

 

⇐ Предыдущая891011121314151617Следующая ⇒

Поделиться: