Единицы измерения токсина и антитоксина

DLМ (Dosis letalis minima) - минимальная летальная доза, т.е. наименьшая доза токсина, способная убить морскую свинку массой 250 г в течение 4 дней после подкожного или внутрибрюшинного введения;

МЕ - международная единица антитоксина, соответствующая его количеству, содержащемуся в 0,0628 мг стандартного, высушенного антитоксина, хранящегося в качестве эталона в Копенгагенском институте сывороток;

LO - наибольшее количество токсина, которое в смеси с одной единицей антитоксина, при введении подкожно морской свинке массой 250 г не дает никакой видимой реакции;

Lt (Limes tod) - наименьшее количество токсина, которое в смеси с одной антитоксической единицей, введенное подкожно морской свинке массой 250 г, приводит к ее гибели в течение 4 дней;

Lf - доза или единица флоккуляции. Это количество токсина, которое в смеси с одной единицей антитоксина даёт самую быструю (начальную) флоккуляцию.

Приложение 19

Определение активности анатоксина по известной антитоксической сыворотке (титр 200 АЕ в 1 мл) в реакции флоккуляции

Ингредиенты	Номера пробирок и их содержимое
	1	2	3	4	5	6	7	8	9
Анатоксин, мл	0,1	0,15	0,2	0,25	0,3	0,35	0,4	0,45	0,5
Физ. раствор, мл	0,9	0,85	0,8	0,75	0,7	0,65	0,6	0,55	0,5
Антитоксин 200 АЕ в 1 мл (1:200)	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0
5´ 10´ инициальная флоккуляция   15´		+	+ +	+

Инициальная флоккуляция наступила в пробирке № 3

В 1 мл антитоксина содержится 1 АЕ.

В 0,2 мл анатоксина      содержится, следовательно, 1 IЕ, титр анатоксина: 1 х 5 = 5 IЕ/мл.

 

2. Определение титра антитоксической сыворотки по известному анатоксину

(титр 5000 IE в мл) в р. флоккуляции

Ингредиенты	Номера пробирок и их содержимое
	1	2	3	4	5		6	7	8	9
Антитоксическая сыворотка, мл	0,1	0,15	0,2	0,25	0,3		0,35	0,4	0,45	0,5
Физиол. раствор 0,85 %, мл	0,9	0,85	0,8	0,75	0,7		0,65	0,6	0,55	0,5
Анатоксин 500 IE в 1мл	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0		1,0	1,0	1,0	1,0
Инкубация при +45С°
5' Инициальная флоккуляция 10' 15'		+	+ +	+ + +		+ +	+

Инициальная флоккуляция наступила в пробирке № 4

В 1 мл анатоксина 500 IE. В 0,25 мл анатоксина – 500 АЕ, а в 1 мл будет в 4 раза больше, т.е. титр анатоксина 2000 АЕ/мл.

Приложение 20

Постановка реакции нейтрализации токсина антитоксином ин виво

Постановка реакции на морских свинках осуществляется по тому же принципу, что и реакция флокуляции с использованием тех же ингредиентов и схемы, но разные разведения или количество содержимого пробирок вводятся морским свинкам весом 250 г. подкожно или внутрибрюшинно. Учет производят через 4 суток по гибели животного, получившего токсин в смеси с 1 АЕ антитоксической сыворотки. Это Limes tod ( Lt ).

Постановка реакций на человеке

— Реакция Дика. С целью определения уровня антитоксического иммунитета к скарлатине у здорового человека, выполняют кожную пробу с очищенным токсином — эритрогенином. В ладонную поверхность предплечья строго внутрикожно вводят 0.1 мл (1 кожную дозу) эритрогенина. Реакцию учитывают через 24 часа после введения. Ее считают положительной при отсутствии покраснения и отрицательной при наличии его диаметром более 1 см. Положительный результат говорит об антитоксическом иммунитете, отрицательный – об его отсутствии.    

— Реакция Шика – это реакция нейтрализации дифтерийного токсина анатоксинами организма. Она ставится для оценки напряжённости иммунитета к дифтерии. Пробу выполняют со стабилизированным, очищенным дифтерийным токсином. Последний разводят так, что бы в 0,2 мл содержалась 1/40 ДЛМ для морской свинки. Эту одну дозу вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечья. Учет результатов ведут через 24 часа. При наличии в сыворотке крови обследуемого 1/30 AE/мл происходит нейтрализация токсина и на месте введения не будет покраснения. Это говорит о хорошем иммунитете.

— Феномен гашения сыпи ставится на больных с диагностической и лечебной целью. Сыпь, например, при скарлатине — результат действия токсина возбудителя на мелкие капилляры. При подкожном или внутрикожном введении специфической антитоксической сыворотки наступает нейтрализация токсина и сыпь на этом участке исчезает, «гасится». Это дает возможность и диагностировать заболевание, и частично его лечить.

      Приложение 21

⇐ Предыдущая1234567Следующая ⇒

Поделиться: