МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭЯКУЛЯТА

Микробиологическое исследование эякулята проводят один раз в квартал. Для микробиологического исследования в лабораторию направляют 1 мл эякулята. Если для транспортировки требуется более двух часов, то материал в пробирке перевозят в термосе со льдом. Промежуток времени от взятия спермы до посева не должен превышать более шести часов. В лаборатории из спермы делают разбавления 1 : 10, 1 : 100 и 1 : 1000. Для этого в каждую пробирку вводят 4,5 мл стерильного изотонического раствора натрия хлорида. В первую пробирку добавляют 0,5 мл неразбавленной спермы. После перемешивания из первой пробирки во вторую вносят 0,5 мл. В третью пробирку из 2-ой 0,5 мл.

Микробиологическим исследованием устанавливают содержание микробов в 1 см³ эякулята, наличие грибов, коли-титр.

Определение содержания микробов

в 1 СМ³ эякулята

Материал и оборудование: эякулят в разбавлении 1:100, стерильные чашки Петри, МПА с 1% раствором глюкозы, стерильные палочки Дригальского, стерильные пипетки на 1 см³, термостат, водяная баня.

Посевы делают на четыре чашки Петри. Для этого на среду наносят стерильной пипеткой 0,5 см³ разбавленной 1:100 спермы и равномерно покрывают ею всю поверхность. После посева чашки Петри помещают на 48 часов в термостат при температуре 37,5^оС (± 0,5^оС). Если сперма слабо загрязненная, то колонии подсчитывают по всей поверхности чашки. При сильной загрязненности поверхность чашки разделяют на несколько секторов, подсчет колоний производят только в одном секторе. Количество микробов в 1 см³ эякулята (С) вычисляют по формуле:

, где:

N - количество подсчитанных колоний;

Д - степень разбавления спермы;

V - количество посеянной спермы (см³);

S - площадь сектора, на которой проводили подсчет колоний (1/4, 1/2 и т.д. из площади чашки Петри).

Вычисление содержания микробов в 1 см³ эякулята основывается на среднем арифметическом четырех исследований. При этом учитывают только те результаты, разница между которыми не более 20%. Определение вида и патогенности изолированных микробных штаммов производится общепризнанными методами. Эякулят быка считают годным, если он не содержит патогенных и потенциально патогенных микробов, а содержание апатогенных микробов в 1 см³ не превышает 5000.

Быков, в эякуляте которых обнаружено более пяти тысяч апатогенных микробов в 1 см³ или найдена синегнойная палочка, повторно исследуют не менее трех раз с интервалом 6-10 дней. Если и при этих исследованиях будет установлена та же микрофлора и в тех же или несколько меньших (до 30%) количествах, таких производителей считают бактерионосителями, от них прекращают использовать сперму и проводят соответствующее лечение. При отсутствии лечебного эффекта производителей выбраковывают.

Определение коли-титра

Материал и оборудование: разбавленная сперма (1:10, 1:100, 1:1000), стерильные пипетки, среда Бумера, термостат, среда Эндо.

Из каждого разбавления спермы делают стерильной пипеткой посевы (по 1 см³) в среду Бумера. Посевы инкубируют в течение 18-24 часов при температуре ± 43-44^оС.

При росте кишечной палочки среда становится желтой и мутной, и в бродильной трубке накапливается газ. Из таких пробирок делают посевы на среду Эндо. Эти посевы инкубируют в термостате в течение суток. Если выросли колонии микробов с характерным ростом колоний кишечной палочки (ярко красный цвет), тогда делают мазки и окрашивают по Граму.

Пригодными к применению считают эякуляты быка, коли-титр которых не более 1:10.

ВЛИЯНИЕ НА СПЕРМИЕВ ФИЗИЧЕСКИХ И ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ

Материал и оборудование: сперма, микроскопы, предметные и покровные стекла, глазные пипетки, пипетка на 1 мл, термостолик, лед в чашке, горячая вода, 2,9% раствор натрия цитрата, 0,9% и 3% раствор натрия хлорида, дистиллированная вода, раствор калия перманганата 1:3000, 2% раствор формалина, 96% спирт, 5% настойка йода, вата, марлевые салфетки, фильтровальная бумага.

⇐ Предыдущая45678910111213Следующая ⇒

Поделиться: