Извлечение эмбрионов (зигот) у доноров

     До середины семидесятых годов минувшего столетия эмбрионы извлекали исключительно хирургическим методом, при доступе к матке через разрез стенки живота по белой линии либо в области голодной ямки.

    К настоящему времени он полностью уступил место нехирургическому методу как более дешевому, легко выполнимому и безопасному.

    Лучший срок для нехирургического извлечения эмбрионов – 7-8-е сутки (отсчет ведут от первого осеменения); в это время они находятся в переднем и среднем сегментах рогов матки, а сфинктер яйцепровода плотно закрыт.

    Эту процедуру проводят в манеже, оборудованном фиксационным станком. Подготовка донора включает 12-часовую голодную диету, обследование яичников на наличие желтых тел, обмывание загрязненных мест и чистку кожного покрова.

    Животное фиксируют в станке, освобождают прямую кишку от фекалий. Хвост бинтуют и подвязывают к шее. Область наружных половых органов и промежность моют теплой водой с мылом, кожу осушают салфеткой, дезинфицируют спреем «Септонекс» либо 70⁰ этиловым спиртом. Для раскрытия канала шейки матки и снятия напряжения прямой кишки делают низкую эпидуральную анестезию – вводят 2%-ный раствор новокаина в дозе 5, 0 мл в эпидуральное пространство между первым и вторым хвостовыми позвонками. Строптивым коровам инъецируют внутримышечно обездвиживающее средство (рометар) из расчета 0, 25 мл на 100 кг массы тела животного.

     Вымывание эмбрионов проводят при помощи двух- или трехканального катетера Фоллея, изготовляемого из резины либо эластичной пластмассы. Трехканальный катетер Фоллея (рис.43) представляет собой резиновую либо пластиковую трубку с тремя внутренними каналами. Один из каналов сообщается с надувной манжеткой (3), расположенной на наружной поверхности катетера, ближе к его переднему концу. Через патрубок (5) происходит нагнетание воздуха в манжетку.

      

     

 

 

 

       

 

 

         

         

 

 

         Рис. 43. Трехканальный катетер Фоллея

 

    Другой канал предназначен для ввода промывной жидкости в рог матки через патрубок (6) и отверстия (2) в передней части катетера.

     Через шланг (7), присоединяемый к третьему каналу, промывная жидкость с эмбрионами отсасывается в стеклянную бутыль. Поступление промывной жидкости из рога матки происходит через отверстие (1) в концевой части катетера. Катетер снабжен стилетом (тонкий стальной стержень) для придания жесткости, обеспечивающей прохождение цервикального канала.

     Перед каждым использованием катетер Фоллея и его составные части стерилизуют кипячением в дистиллированной воде (резиновые катетеры – холодным способом, с использованием 70⁰ спирта-ректификата). После сборки катетера наружную его поверхность покрывают тонким слоем простерилизованного вазелинового масла.

     Левую руку вводят в прямую кишку, освобождают ее от фекалий. Катетер, заключенный в санитарный чехол, вместе со стилетом направляют в наружное отверстие канала шейки матки и расчехляют. Ладонью левой руки захватывают шейку и поворачивая ее влево-вправо, натягивают на катетер, после чего катетер направляют в один из рогов. Как только верхушка катетера достигнет середины рога, дальнейшее его продвижение проводят одновременно с извлечением стилета. Убедившись в том, что конец катетера находится вблизи верхушки рога, а баллон впереди бифуркации, стилет полностью вынимают из катетера. При помощи 20-граммового шприца манжетку заполняют воздухом в объеме 10-15 см³, что обеспечивает фиксацию катетера с одновременной изоляцией промывной полости, ограниченной передним участком рога матки. Далее к катетеру присоединяют специальный шприц объемом 50 мл и медленно вводят в рог матки 40-50 мл фосфатного буфера Дюльбекко, содержащего 1% инактивированной сыворотки крови новорожденного теленка. Промывную жидкость отсасывают шприцем и собирают в стерильный сосуд. Вымывание повторяют 4-6 раз, расходуя 200-400 мл среды Дюльбекко. При вымывании учитывают объем раствора, полученного из матки, так как с его уменьшением число вымытых эмбрионов снижается. Потери раствора обычно связаны с недостаточной герметизацией промывной полости или нарушением целостности эндометрия (жидкость легко поглощается подслизистым слоем). Катетер переводят во второй рог и манипуляции по вымыванию эмбрионов повторяют в том же порядке. Процедура вымывания эмбрионов обычно длится 20-50 мин.

     После завершения вымывания эмбрионов вводят через катетер Фоллея в рог матки растворенный в 20 мл 0, 5%-ного новокаина антибиотик, например, гентамицин в дозе 500 мг, чтобы предупредить осложнения. Если планируется повторное использование коровы в качестве донора, на 5-6-е сутки ей инъецируют эстрофан, что предотвращает развитие стельности и ускоряет возобновление очередного полового цикла.

        

 

 

 

 

 

Рис. 44. Техника нехирургического извлечения эмбрионов

 

 

     Нехирургическим путем удается извлечь 60-80% эмбрионов от общего числа находящихся в рогах матки. Повысить эффективность вымывания эмбрионов можно путем массажа переднего (отграниченного) участка рога матки, придав ему приподнятое положение.

 

⇐ Предыдущая28293031323334353637Следующая ⇒

Поделиться: