Зайцев А. М., Храброва Л. А, к.с.-х.н.

Всероссийский научно-исследовательский институт коневодства

391105, Рязанская обл., Рыбновский р-н, п/о Институт коневодства

В настоящее время проблема сохранения генофондов локальных пород лошадей становится особенно актуальной. Ряд местных пород, разводящихся только на территории России, находятся под угрозой исчезновения. С целью их сохранения МСХП РФ, РАСХН И РАН была создана Федеральная программа «Сохранение генофонда малочисленных пород сельскохозяйственных животных на 1995-2005 г.г.». Для соответствующего выполнения такого рода программ сохранения необходимы глубокие исследования их генетических особенностей и проведение мониторинга генетического разнообразия. Для этих целей наиболее пригодно генетическое маркирование. Генотипирование лошадей по антигенам групп крови, электрофоретическим вариантам белков и ДНК-последовательностям является базой генетического мониторинга, который позволяет оценить уровень генетического разнообразия и его изменения в популяциях лошадей. Изучение генетических особенностей распределения аллельных частот, появляющихся под влиянием факторов отбора представляет интерес и с точки зрения изучения филогенетических связей между породами.

Одной из малочисленных аборигенных пород севера России является вятская лошадь, выведенная методами народной селекции на севере Удмуртии. «Вятка» входит в состав группы северных пород лошадей и, по мнению ряда исследователей, имеет зоологическую основу, характерную для азиатской породной группы. Существуют разные мнения о происхождении вятской лошади. Несомненно, что в ее формировании использовались улучшающие породы. К сожалению, сведения о влиянии других пород на вятскую не документированы и исследователи приводят целый ряд пород, которые могли использоваться как улучшатели. Однако, несмотря на все это, вятские лошади сохранили свое генетическое своеобразие. Вятская порода, ранее широко распространенная, встречается сейчас также в Кировской и Костромской областях. Поголовье вятской лошади очень невелико, но достаточно для возрождения. К 1996 году было выявлено около 200 лошадей в типе «вятка» в 20 хозяйствах, самое типичное поголовье сосредоточено в колхозе «Колос» (Бобкова Н.Ф., 1996).

Вятские лошади описываются как сравнительно некрупные, приземистые, с небольшой головой. Масть вятской лошади - высокоустойчивый признак, преобладает саврасая масть с встречающимися атавистическими признаками, характерными для аборигенных степных и лесных пород («ремень» на спине, частичная зеброидность, «крылья», «налеты»), однако встречаются типичные вятки и других мастей. Лошади отличаются спокойствием в работе, выносливостью, быстротой, энергичностью, неприхотливостью, хорошо адаптированы к местным климатическим и кормовым условиям (в частности, к глубокому снеговому покрову). Рекорды лучших вятских жеребцов, установленные в прошлом, указывают на большие потенциальные возможности совершенствования рабочих качеств. Вятские лошади менее подвержены заболеваниям, отличаются большей плодовитостью и выживаемостью, чем лошади других пород, содержащиеся в одинаковых с ними условиях. Эти характеристики позволили вятской породе в прошлом стать популярной рабочей и военной обозной лошадью и послужили предпосылкой того, что уже в XVII веке вятки активно вывозилась из мест разведения.

Новое возрождение вятской породы началось с середины 80-х годов. В 1994-1995 г.г. утверждены и изданы «Инструкция по бонитировке лошадей вятской породы», «Каталог племенных вятских лошадей Удмуртии, Кировской и Костромской областей».

По просьбе Министерства сельского хозяйства Удмуртии в 2000-2002 гг. лабораторией иммуногенетики ВНИИК было проведено тестирование производящего состава (n=124) вятских лошадей из ряда хозяйств Удмуртии («Колос», «Чутырский», «Россия», «Коротай») и одного хозяйства Кировской области («Гордино») по 8 полиморфным системам крови, включая группы крови А, D, К, белки и ферменты (Es, Tf, Alb, PGD, Ca). Также было проведено определение полиморфизма RAPD-маркеров ДНК с праймерами UBC-85 и UBC-126. Определение полиморфных типов структурных генов - трансферрина, альбумина и сывороточной карбоксилэстеразы - проводили методом горизонтального электрофореза в крахмальном геле по общепринятым методикам (Дубровская Р.М., 1986). Эритроцитарные антигены тестировали с помощью моноспецифических сывороток-реагентов, изготовленных в лаборатории иммуногенетики. Анализ полиморфизма последовательностей ДНК проводился по методике E. Bailey, T. L. Lear, 1994, в адаптациях Г. Е. Сулимовой, 1999, и В. И. Глазко, 1996. На основании полученных данных был проведен генетико-статистический анализ популяции вятской лошади, результаты которого представлены в таблице.

Таблица

Распределение аллельных частот пяти локусов белков и

ферментов крови в субпопуляциях лошадей вятской породы

Локус	Аллель	Хозяйство
Удмуртия	Кировская область
«Колос»	«Чутырское»	«Россия»	«Коротай»	«Гордино»
n=59	n=20	n=9	n=5	n=31
Tf	D	0, 1356 ±0, 0315	0, 0250 ±0, 0247	0, 1111 ±0, 0741	0, 1000 ±0, 0949	0, 0000
F	0, 5254 ±0, 0460	0, 7000 ±0, 0725	0, 6111 ±0, 1149	0, 7000 ±0, 1449	0, 5000 ±0, 0635
H	0, 0509 ±0, 0202	0, 2250 ±0, 0660	0, 1111 ±0, 0741	0, 0000	0, 0000
O	0, 1271 ±0, 0307	0, 0000	0, 0556 ±0, 0540	0, 1000 ±0, 0949	0, 0484 ±0, 0273
R	0, 1271 ±0, 0307	0, 0250 ±0, 0247	0, 0556 ±0, 0540	0, 1000 ±0, 0949	0, 4516 ±0, 0632
Alb	A	0, 2457 ±0, 0396	0, 2750 ±0, 0706	0, 3889 ±0, 1149	0, 3000 ±0, 1449	0, 2097 ±0, 0517
B	0, 7203 ±0, 0396	0, 7250 ±0, 0706	0, 6111 ±0, 1149	0, 7000 ±0, 1449	0, 7903 ±0, 0517
Es	F	0, 1695 ±0, 0345	0, 3250 ±0, 0741	0, 1111 ±0, 0741	0, 0000	0, 3065 ±0, 0586
G	0, 1356 ±0, 0315	0, 1250 ±0, 0523	0, 0556 ±0, 0540	0, 2000 ±0, 1265	0, 0807 ±0, 0346
I	0, 6610 ±0, 0436	0, 5500 ±0, 0787	0, 8333 ±0, 0879	0, 8000 ±0, 1265	0, 6129 ±0, 0619
Ca	F	0, 0170 ±0, 0119	0, 0000	0, 0000	0, 0000	0, 0161 ±0, 0160
L	0, 0763 ±0, 0244	0, 0000	0, 0000	0, 0000	0, 0484 ±0, 0273
I	0, 9067 ±0, 0268	1, 0	0, 9444 ±0, 0540	1, 0	0, 9355 ±0, 0312
O	0, 0000	0, 0000	0, 0556 ±0, 0540	0, 0000	0, 0000
PGD	F	0, 8136 ±0, 0359	1, 0	0, 8333 ±0, 0879	0, 9000 ±0, 0949	0, 5645 ±0, 0630
S	0, 1864 ±0, 0359	0, 0000	0, 1667 ±0, 0879	0, 1000 ±0, 0949	0, 4355 ±0, 0630

Распределение аллельных частот локуса альбумина было сходно у субпопуляций всех исследованных хозяйств, незначительное снижение частоты аллеля Al^A было отмечено в кировской субпопуляции.

При тестировании вятских лошадей в локусе трансферрина выявлено 5 аллелей - Tf^D, Tf^F, Tf^H, Tf^O, Tf^R. Преобладающим являлся аллель Tf^F, частота встречаемости которого оказалась минимальной в популяции хозяйства «Колос» (0, 5431), а в среднем для удмуртской популяции – 0, 0604, и генотип Tf^FF (в среднем 35, 1%), другие аллели представлены в выборке с близкими частотами (Tf^D- 0, 1064, Tf^H- 0, 0958, Tf^O- 0, 0958, Tf^R- 0, 0958). Распределение аллельных частот изученных локусов между кировской и удмуртской популяциями значительно отличалось. Так, в кировской популяции было представлено всего три аллеля локуса трансферрина из пяти, обнаруженных у вятских лошадей Удмуртии, причем суммарная частота двух из них составила 0, 9516.

В локусе эстеразы у вятской лошади выявлено три аллеля - Es^F, Es^G и Es^I. Преимущественное распространение имел аллель Es^I, частота которого колебалась от 0, 5500 («Чутырский») до 0, 8333 («Россия») и в среднем для всей популяции составляла 0, 6809. Частоты аллелей Es^F и Es^G для популяции в целом соответственно равны 0, 1862 и 0, 1330. Следует отметить высокую частоту аллеля Es^F (0, 3250) в колхозе «Чутырский» и низкую частоту аллеля Es^G(0, 0556) в колхозе «Россия». Поголовье хозяйства «Гордино» отличалось относительно высокой частотой аллеля Es^F и сниженной – аллеля Es^G.

В локусах эритроцитарных ферментов также прослеживалась определенная дифференциация между субпопуляциями. В локусе карбоангидразы наибольшее сходство отмечено между субпопуляциями хозяйств «Колос» и «Гордино», обладающих наибольшим поголовьем. Среди лошадей хозяйства «Россия» выявлен аллель Са^L, не представленный у других лошадей вятской породы. Поголовье двух хозяйств Удмуртии оказалось полностью гомозиготным по этому локусу.

Генетическая система 6-фосфоглюконатдегидрогеназы представлена двумя аллелями – PGD^F и PGD^S. Частота аллеля PGD^Fу лошадей Удмуртии колебалась от 0, 8136 до 1, 0. Кировская субпопуляция отличается от удмуртской пониженной частотой аллеля PGD^F(0, 5645)

Аллелофонд по группе крови А был характерным для местных пород и значительно отличался от такого у заводских пород лошадей, в том числе и тех, которые предположительно участвовали в улучшении вятской лошади. Выявлено 3 варианта эритроцитарных антигенов группы крови А: А^-, А^a, А^d. Тип А^ad встречался с частотой более 59 %, тип А^d - 33, 8%, при этом антиген А^-встречался с низкой частотой, а тип А^aа не был представлен. Сравнительный анализ генотипов по группе крови D выявил преобладание редкого аллеля D^ad - 0, 3716 и генотипа D^ad/de- более 27 %, что также характерно для аборигенных пород. Дифференциация субпопуляций по системам групп крови была выражена в меньшей степени, общей тенденцией является повышение уровня генетической гетерогенности в больших выборках.

На уровне молекулярно-генетических маркеров ДНК при сравнении спектров распределения продуктов амплификации удмуртской и кировской субпопуляций выявлены четко наблюдаемые различия, проявляющиеся в неравномерном распределении фрагментов амплифицированной ДНК разной длины.

Между субпопуляциями разных хозяйств отмечены существенные различия как по наличию аллелей, так и по распределению аллельных частот практически всех изученных локусов. В наибольшей степени дифференциация проявилась при сравнении удмуртской и кировской популяций. Интересно, что наличие дифференциации по промерам между этими группами вятских лошадей было отмечено еще в 50-е годы прошлого столетия.

Наиболее типичные вятки хозяйств «Колос» и «Гордино» имели самую высокую полиморфность практически всех исследованных локусов.

Полученные результаты позволяют утверждать, что аллелофонд вятских лошадей имеет оригинальную генетическую структуру, в целом характерную для аборигенных пород, а порода – достаточно высокий уровень полиморфизма.

Для поддержания генетического разнообразия в этой малочисленной локальной породе необходимо разработать научно обоснованную программу сохранения генофонда, основанную на результатах генетического тестирования с использованием биохимических и ДНК-маркеров и систематическом проведении генетического мониторинга.

ЛИТЕРАТУРА

1. Генетические ресурсы сельскохозяйственных животных в России и сопредельных странах//Составители Л. К. Эрнст, Н. Г. Дмитриев, И. А. Паронян.–С.-Пб.: ФАО/ЮНЕП и РАСХН.–1994.–471 с.

2. Книга о лошади//Под ред. С. М. Буденного.–М.–Гос. изд-во с/х литературы.–1952.–т. 1.–608 с.

3. М. В. Костюченко, И. Г. Удина, А. М. Зайцев и др. ДНК-технологии для оценки генетического разнообразия пород лошадей отечественной селекции//Сельскохозяйственная биология.–2001.–№ 6.–С. 29-33.

4. Методические рекомендации по использованию иммуногенетических маркеров для оценки изменений генетической структуры популяций (пород) лошадей.–Дивово, 1995.–33 с.

5. Столповский Ю. А. Консервация генетических ресурсов сельскохозяйственных животных: проблемы и принципы решения.–М. –1997–109 c.

6. Храброва Л. А., Зайцев А. М. Оценка вятской лошади удмуртской популяции// Тез. докл. научно-практ. конф. «Перспективы коневодства России в XXI веке». – ч. 2.–Дивово, 2000.–С. 70-73.

7. L. A. Khrabrova, A. M. Zaitcev The genetic structure of Vyatka horse populations//XXVIII Intern. Conf. on Animal Genetics ISAG.–Gettingen.–2002.–p. 109.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИМОРФНЫХ БЕЛКОВ КРОВИ

ПРИ СЕЛЕКЦИИ МЕЗЕНСКИХ ЛОШАДЕЙ

НА ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫЕ СПОСОБНОСТИ

Вдовина Н.В.

Архангельский научно-исследовательский институт сельского хозяйства

163059, г. Архангельск, ул. Ильича, д. 43

Воспроизводительная способность лошадей является одним из важных показателей в селекционно-племенной работе с любой породой.

Воспроизводство в условиях Крайнего Севера сопряжено с трудностями приспособительного характера. Значительные колебания зимних и летних температур, большая продолжительность тёмного периода времени, краткосрочность пастбищного сезона и возможности восполнить запасы организма требуют от животных высоких адаптационных способностей. Микроэволюция лошадей местной породы Архангельской области – мезенской - на протяжении многих столетий способствовала созданию массива крепких, выносливых животных.

Лошади мезенской породы имеют хорошие воспроизводительные способности. У жеребцов наблюдается высокий процент зажеребляемости – 86, 4 %. Кобылы также имеют высокий процент зажеребляемости (88, 7 %) и благополучной выжеребки (91, 2 %).

В коневодстве за последние годы отмечается значительное продвижение в области иммуногенетики. В частности изучена связь и выявлена зависимость между воспроизводительными способностями и гетерогенностью воспроизводящего состава по полиморфным белкам крови, что отмечается многими авторами (Дубровская Р.М. и др., 1982; Нехорина Е.Е. и др., 2000; Купцова Н.А. и др., 2001).

В связи с этим нами были проведены исследования оплодотворяющей способности мезенских жеребцов разного уровня гетерозиготности по локусам полиморфных белков - трансферрина, альбумина, эстеразы. Репродуктивные показатели кобыл изучались по локусу трансферрина.

В исследование взяты 154 образца крови мезенских лошадей из 5 хозяйств Мезенского района.

Оплодотворяющая способность жеребцов мезенской породы (n = 33) определена по результатам 578 покрытий 121 кобылы за период с 1993 по 2001 годы. Результаты покрытий кобыл взяты из племенных карточек.

В зависимости от степени гетерозиготности по аллелям отдельных локусов полиморфных белков крови, жеребцы были разбиты на две группы: гомозиготные и гетерозиготные. Об оплодотворяющей способности производителей каждой группы судили по зажеребляемости кобыл.

Показатели оплодотворяющей способности мезенских жеребцов в зависимости от уровня их гетерозиготности по аллелям локусов трансферрина, альбумина и эстеразы приведены в таблице.

Таблица

Оплодотворяющая способность мезенских жеребцов в зависимости от уровня гетерозиготности полиморфных белков крови

Локус	Уровень гетерозиготности	Число жеребцов	Число покрытий	Оплодотворяющая способность, в %
Tf	гомозиготные			94, 6
гетерозиготные			96, 0
Al	гомозиготные			96, 2
гетерозиготные			94, 5
Es	гомозиготные			94, 8
гетерозиготные			95, 8

Как видно из таблицы, гетерозиготные по локусам трансферрина и эстеразы жеребцы незначительно превосходят по оплодотворяющей способности гомозиготных производителей, а в локусе альбумина гомогенные жеребцы превосходят гетерогенных на 1, 7 %. В целом же все жеребцы имеют высокую оплодотворяющую способность (94, 5 – 96, 2 %), которая, как подтвердили наши исследования, не связана с уровнем их гетерозиготности по локусам полиморфных белков.

Воспроизводительную способность кобыл мезенской породы определяли по показателям зажеребляемости и благополучной выжеребки.

Сравнивались показатели плодовитости кобыл при различных сочетаниях, с учётом особенностей родительских пар по трансферриновому локусу. Все варианты подборов объединили в три группы. В первую группу вошли родительские пары, в которых оба родителя гомозиготны по локусу трансферрина. Вторая группа включала в себя родительские пары, в которых один из родителей был гомозиготным, а второй из родителей – гетерозиготным. В третьей группе и кобылы и жеребцы были гетерозиготны по локусу трансферрина.

Анализ проведённых иследований показал, что во всех трёх группах уровень зажеребляемости кобыл мезенской породы очень высокий и варьирует в пределах 94, 0 – 96, 4 %. Однако наиболее высокий выход молодняка отмечен в варианте, когда кобыла и жеребец гетерозиготны по Tf (89, 2 %). В сочетании гомозиготных пар выход молодняка самый низкий и составляет 80, 0 %.

Варианты подборов в зависимости от вероятности рождения гомозиготного или гетерозиготного по аллелям трансферринового локуса потомства были объединены в четыре группы.

В первом варианте подбора весь полученный молодняк был гомозиготный. Второй вариант подбора давал равное количество гомозиготных и гетерозиготных по локусу трансферрина жеребят. От подборов третьей группы получали 25 % гомозиготных и 75 % гетерозиготных жеребят. В четвёртой группе рождались только гетерозиготные животные.

Результаты исследований показали, что наименьший процент живых жеребят (79, 2 %) приходится на вариант подбора, когда от кобыл и жеребцов рождается только гомозиготный по трансферрину приплод, хотя процент зажеребляемости кобыл в данной группе и высок (93, 0 %). Лучшие показатели по выходу жеребят (90, 5 %) отмечены при подборах, в которых 25 % приходится на гомозиготный приплод и 75 % - на гетерозиготный. Зажеребляемость кобыл в этой группе составила 94, 2 %. Деловой выход жеребят во второй и четвёртой группах практически одинаков и составил 85, 4 % и 85, 0 % соответственно.

Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод о возможности использования генетических маркеров, в частности локусов полиморфных белков крови, при селекции лошадей на воспроизводительные способности.

ЗАДАЧИ ПЛЕМЕННОЙ РАБОТЫ

⇐ Предыдущая 6 7 8 9 101112 13 14 15 Следующая ⇒