Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


Метод по определению бактерицидной активности.



Определение бактерицидной активности и дезинфекционной способности препаратов «Sansept0200» и «Sanoxsept» проводили в соответствии с «Пра­вилами проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ве­теринарного надзора», 2002. В работе использовали бактериальные тест-культуры музейных штаммов Е. соli (шт. 1257) и Stahp. aureus (шт. 209).

Музейные штаммы бактерий хранились в холодильнике при температуре +3 +4°С в виде посевов на мясо-пептонном агаре (посев уколом).

Суточную культуру кишечной палочки и золотистого стафилококка
засевали на скошенный МПА и выращивали в термостате при температуре
37°Ов течение 18-24 ч.

Методика контроля качества дезинфекции.

Эффективность обеззараживания обработанных растворами «Sansept0200» и «Sanoxsept» поверхностей в лабораторных условиях оценивали с помощью тест-объектов - деревянных, бетонных, металлических, и из кафеля размером 10x10 см, контаминированных тест-микробами. В производственных услови­ях контроль качества дезинфекции проводили методом смывов в соответствии с «Правилами проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государ­ственного ветеринарного надзора» (2002).

В работе использовали суточную культуру музейных штаммов Е. coli (шт. 1257) и Stahp. aureus (шт. 209).

Для приготовления бактериальной взвеси культуры заливали на 1/3 про­бирки 0, 9% раствором хлорида натрия и оставляли на 3-5 минут в наклонном положении с таким расчетом, чтобы жидкость покрыла всю поверхность сре­ды. После этого, встряхивая пробирку или вращая её между ладонями, смы­вали культуру. Полученную взвесь сливали в стерильную колбу, встряхивали её до образования гомогенной взвеси, фильтровали с соблюдением стерильности через рыхлый ватно-марлевый фильтр и разводили 0, 9% раствором хлорида натрия до кон­центрации 2 млрд. микробных тел в 1 мл.

Тест-объекты заражали из расчета 10-20 микробных тел на 1 см поверх­ности. Взвесь микробов готовили на стерильной водопроводной воде с со­держанием 2 млрд микробных тел в 1 мл. 2. Контаминированные тест-объекты подсушивали в течение 1 -2 ч при комнат­ной температуре, после чего их в соответствии с опытом располагали в по­мещении, где проводили обработку (на полу, стенах, потолке) на специально изготовленных деревянных щитах площадью 1 м2. После окончания заданной экспозиции с тест-объектов брали смывы стерильным ватным тампоном, ув­лажнённым раствором нейтрализатора. Тампоны помещали в пробирки с 10 мл нейтрализатора и доставляли в лабораторию. Для нейтрализации препаратов «Sansept0200» и «Sanoxsept» использовали водопроводную воду. Пробы после отжатия и промывания тампона в воде или в растворе нейтрализатора центрифугировали в стерильной водопроводной воде (2500 об\мин) в течение 30 минут. Осадок после двукратного центрифугирования разбавляли 1 мл фи­зиологического раствора и высевали на питательные среды: МПБ с 6, 5% хло­рида натрия с последующим пересевом на МПА с 8, 5% хлорида натрия - для стафилококка, среду Эндо - для выделения кишечной палочки. Посевы вы­держивали в термостате при 37°С до 5 суток.

Анализу подвергались пробы с поверхностей производственных поме­щений до и после проведения дезинфекции и соответствующей экспозиции. В производственных опытах контроль качества дезинфекции и содержания дей­ствующего вещества в дезинфицирующих средствах и их растворах осущест­вляли согласно методике, данной в приложении Правил проведения дезин­фекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора (2002).

Оборудование, аппаратура и приборы.

Экспериментальные исследования проводили с использованием:

- микроскопа МБИ-3;

- ртутных термометров;

- дезинфекционной установки ДУК;

- эксикатора;

- термостата электрического суховоздушного ТС-80 М-2;

- стерилизатора сухожарового СС-200М;

- центрифуги.

Дезинфицирующие препараты.

«Sanoxsept» ТУ 2484-010-05744685-96

«Sansept0200» ТУ 2482-183-05744685-01

Краткая характеристика дезинфицирующих средств.

 


«Sansept0200»-дезинфецирующее средство, выпускается польской фирмой «Sanechem».

Средства дезинфекции на основе ЧАС. Состав: деминерализованная вода, КПАВ (ЧАС) – 25 %, функциональные добавки, краситель представляет собой прозрачную жидкость от бесцветного до светло-желтого цвета со специфическим запахом. Малой степени токсичности (IVкласс рабочих растворов). Дезинфектант обладает антимикробным действием в отношении широкого спектра грамотрицательных и грамположительных бактерий (включая микобактерии туберкулеза), спорообразующих микроорганизмов.

Предназначено для дезинфекции:

— животноводческих, свиноводческих, звероводческих, птицеводческих помещений (полы, стены, потолки, перегородки) содержания животных и находящегося в них технологического оборудования

— производственных помещений и технологического оборудования на предприятиях мясо - и птицеперерабатывающей промышленности и цехов по переработке продуктов убоя, помещений санитарных боен на мясокомбинатах и убойных пунктов, холодильных камер;

— складских помещений, карантинных баз и других подконтрольных объектов, с которыми соприкасалась продукция животного происхождения, неблагополучная в ветеринарно-санитарном отношении, а также открытых объектов (рампы, эстакады, платформы), мест скопления животных (территория и объекты предубойного содержания, рынков, выставок и др.), залов для съемки шкур в звероводстве;

Дезинфекцию рабочими проводят способом орошения, протирания, погружения, замачивания.

«Sanoxsept»- Стабилизированная смесь уксусной кислоты и перекиси водорода. Прозрачная бесцветная жидкость с характерным запахом. Плотность: около 1, 14 г/см куб. при t = 20 гр.С. Значение pH: 2, 0 (1%-ого раствора в дистиллированной воде). Средство рекомендуется использовать для решения различных задач дезинфекции на предприятиях пищевой и перерабатывающей промышленности, сельского хозяйства, на объектах ветнадзора, в различных организациях коммунального хозяйства, общественного питания, торговли, на транспорте.

Обладает высоким бактерицидным, фунгицидным, спороцидным действием. Эффективно действует против всех групп микроорганизмов и вирусов даже при низких температурах и непродолжительном времени воздействия (10–20 мин.) Обладает сильной бактерицидной активностью по отношению к спорообразующим бактериям, кишечной палочке, дрожжам. Резистентность микроорганизмов к дезинфицирующему средству отсутствует. Обладает неограниченной растворимостью в воде.

Результаты исследований.

4.1.Определение бактерицидного и разведения препарата «Sanoxsept» в ла­бораторных условиях.

При изучении бактерицидных свойств препарата вначале опре­делили бактерицидные разведения дезинфектанта. Для этого готовили серий­ные разведения препарата: устанавливали ряд стерильных колб ёмкостью не менее 50 мл каждая. В первую вносили 10 мл основного разведения (1: 50), приготовленного на дистиллированной воде, а во все остальные — по 10 мл стерильной дистиллированной воды. Затем во вторую колбу вносили 25 мл основного разведения (1: 50) и после тщательного перемешивания с имею­щейся там водой 25 мл переносили в следующую колбу и т.д., из последней в ряду колбы 25 мл отливали.

В каждую колбу серийного разведения препарата с интервалом 1 мин. вносили по 0, 2 мл 2 млрд. взвеси суточной культуры кишечной палочки или золотистого стафилококка. После 10-минутной экспозиции с тем же интерва­лом стерильной бактериологической петлей брали пробы и переносили в пробирки с МПБ. Через 30 минут, сохраняя тот же интервал, вновь брали пробы и делали посевы в МПБ.

Одновременно с опытом ставили контроль жизнеспособности культуры: 0, 2 мл 2 млрд. взвеси тест-культуры вносили на 30 минут в колбу с 10 мл дис­тиллированной воды с последующим высевом в МПБ.

Все пробирки ставили в термостат при температуре 37°С. Первичный
учёт результатов проводили через 18-24 часа, вторичный — через 6-7 дней.
Все исследования проводили с трёхкратной повторностью. Результаты определения бактерицидного разведения препарата в отношении куль­тур кишечной палочки и золотистого стафилококка представлены в таблицах1 и 2 соответственно.


 

Таблица №1. Бактерицидное разведение препарата «Sanoxsept» в отношении Escherichia coli (шт. 1257) (среднее значение).

№ колбы Разведение Первичный учёт (10 мин.) Вторичный учёт (30 мин.)
1: 50
1: 70
1: 98
1: 137, 2
1: 192, 1
1: 268, 9
1: 376, 5
1: 527, 1
1: 737, 9
1: 1033, 1
1: 1446, 1 +
1: 2024, 1 +
1: 2834, 7 +
1: 3968, 6 + +
Контроль жизне­способности культуры + +

Примечание: + - есть рост культуры;

- - рост культуры отсутствует.

Среднее значение бактерицидного разведения составляет: 1933, 3

 

 

Таблица №2. Бактерицидное разведение препарата «Sanoxsept» в отношении Staphylococcus aureus (шт. 209-р)(среднее значение).

№ колбы Разведение Первичный учёт (10 мин.) Вторичный учёт (30 мин.)
1: 50
1: 70
1: 98
1: 137, 2
1: 192, 1
1: 268, 9
1: 376, 5
1: 527, 1
1: 737, 9
1: 1033, 1 +
1: 1446, 1 + +
1: 2024, 1 + +
Контроль жиз­неспособности культуры + +

Примечание:

+ - есть рост культуры;

- - рост культуры отсутствует.

Среднее значение бактерицидного разведения составляет: 1800

 


Поделиться:



Популярное:

Последнее изменение этой страницы: 2016-06-05; Просмотров: 1038; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.016 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь