Лабораторные методы исследования не консервированной и мороженой рыбы

Бактериоскопия

На предметных стеклах делают два мазка-отпечатка — один из поверхностных слоев мус­кулатуры сразу же под кожей, второй — из глубоких слоев около позвоночного хребта. Препараты подсушивают на воздухе, фиксируют трехкратным проведением над пламенем горелки и окрашивают по Граму.

 

ПОРЯДОК ОКРАСКИ ПО ГРАММУ
1.	Зафиксированный препарат: покрывают фильтровальной бумагой
2.	На фильтровальную бумагу наносят раствор генцианвиолета и выдерживают 1-2 мин
3.	Снимают фильтровальную бумагу и смывают водой
4.	Наносят раствор Люголя и выдерживают 2 минуты
5.	Раствор смывают водой
6.	На препарат наносят 96° спирти выдерживают 0, 5-1 минуту
7.	Раствор смывают водой
8.	Препарат красят фуксином 1-2 минуты
9.	Краску смывают водой
	С помощью фильтровальной бумаги сушат препарат
	На приготовленный препарат наносят каплю эммерсионного маслаи микроскопируют.

 

Рыба свежая микрофлоры не содержит, могут встречаться лишь единичные кокки и палочки. Препарат из свежей рыбы окрашивается плохо, на стекле не заметно остатков разложившейся ткани.

У рыб подозрительной свежести в мазках из поверхностных слоев мускулатуры находят 30—60 диплококков или диплобактерий, а в мазках из глубоких слоев — 20—30 микроорганизмов. Препарат окрашен удовлетворительно, на стекле ясно заметна распавшаяся ткань мяса.

У не свежая рыбы в мазках из поверхностных слоев мускулатуры обнаруживают более 60 микроорга­низмов, преимущественно палочек, в мазках из глубоких слоев — более 30 микробов. Препарат окрашен сильно, на стекле много распавшейся ткани.

Определение аммиака с реактивом Несслера

Аммиак накапливается в мясе при его разложении. Реакция основана на образовании комплексной соли йодистого димеркураммония желто – оранжевого цвета. Готовят вытяжку в соотношении фарша рыбы с водой 1: 10, выдерживают несколько минут и фильтруют.

Ход реакции: в пробирку наливают 2 мл мясного фильтрата и 0, 5 мл реактива Несслера.

— фильтрат из свежего мяса рыб окрашивается в бледно-желтый цвет или желтоватый цвет;

— фильтрат из несвежего мяса рыб становится оранжевым, выпадает в осадок.

 

Определение числа Несслера

Реакцию ставят с филь­тратом из мышц рыбы, приготовленным так же, как и для определения рН. В пробирку наливают 2 мл фильтрата и добавляют 0, 5 мл реактива Несслера, содержимое пробирки слегка взбалтывают и оставляют на 5 минут. После этого жид­кость центрифугируют 3 минуты, и интенсивность ее цвета сравнивают на белом фоне с цветом жидкостей в пробир­ках бихроматной шкалы.

Рыба свежая — число Несслера до 1, 0;

подозрительной свежести — 1, 2— 1, 4;

несвежая — 1, 6—2, 4 и выше.

Определение сероводорода.

При порче непотрошеной рыбы определение сероводорода может явиться одним из объективных методов распознавания ее санитарного ка­чества, так как накопление сероводорода чаще происхо­дит при разложении белков в анаэробных условиях. Од­нако обычный качественный метод определения сероводо­рода мало чувствителен. Лучшие результаты получаются при нагревании фарша из рыбы до 50—52° (по Пуйдаку).

Определение сероводорода.

Техника реакции такая же, как и при исследовании мяса убойных животных. В зависимости от интенсивности изменения цвета бу­мажки, смоченной раствором уксуснокислого свинца, в бурый или черный цвет реакцию оценивают в крестах следующим образом:

– отрицательная —;

– следы ±;

– слабо­положительная (бурое окрашивание по краям капли); положительная (бурое окрашивание всей капли, более интенсивное по краям) + +;

– резко положительная (ин­тенсивное темно-бурое окрашивание всей капли) + + +.

Определение сероводорода с подо­греванием фарша.

В широкую пробирку рыхло накладывают 15—20 г рыбного фарша. На полоску филь­тровальной бумаги наносят каплю 10%-ного щелочного раствора уксуснокислого свинца, диаметр капли должен быть не более 4—5 мм. Полоску бумаги закрепляют пробкой так, чтобы она свешивалась в середине пробирки. Подготовленную таким образом пробирку помещают в водяную баню, температура воды в которой 50—52°С. Пробирку выдерживают в водяной бане 15 минут, после чего бумажку вынимают и читают реакцию.

– Рыба свежая - капля не окрашивается или при­нимает слабо-бурый цвет

– Рыба подо­зрительной свежести - капля окрашивается в буро-корич­невый цвет

– Несвежая рыба - в темно-коричневый.

Определение концентрации водородных ионов

Произ­водят в вытяжке, приготовленной в соотношении фарша и воды как 1: 10 при 15-минутной экстракции. Методика определения такая же, как и при исследовании мяса убойных животных.

– Рыба, пригодная в пищу, имеет рН от 6, 5 до 6, 8;

– бес­сортная — 6, 9—7;

– несвежая — 7, 1 и выше.

На величину рН рыбы оказывают влияние длительность предсмертного состояния организма, наличие побитостей и патологических процессов. Величина рН выше 6, 9 в мясе внешне свежей рыбы указывает на необходимость немедленной ее реали­зации.

Редуктазная проба (в модификации М. Я. Кондратовой)

Гнилостные микроорганизмы выделяют различные ферменты и среди них восстанавливающий фермент— редуктазу. Наличие редуктазы и ее активность опреде­ляют с помощью окислительно-восстановительных инди­каторов. Под воздействием редуктазы последние обесцве­чиваются. В качестве индикатора применяют метиленовый голубой. Чем быстрее произойдет обесцвечивание вытяжки из рыбы, к которой добавлен раствор метиленового голу­бого, тем активнее редуктаза, а следовательно, и больше гнилостных микроорганизмов.

Ход реакции. Навеску фарша рыбы в 5 г по­мещают в пробирку, заливают дистиллированной водой, встряхивают и оставляют на 30 минут. Затем приливают 1 мл 0, 1%-ного водного раствора метиленового голубого, пробирку встряхивают, чтобы фарш равномерно окрасился, экстракт заливают слоем вазелинового масла толщиной в 1 см. Пробирку ставят в термостат и периодически ведут наблюдение за обесцвечиванием экстракта.

– экстракт из несвежей рыбы обесцвечивается через 20—40 минут;

– экстракт подозрительной свежести из рыбы — от 40 ми­нут до 2, 5 часа,

– из рыбы свежей I или II сорта — позд­нее этого срока.

При учете результатов реакции сохранение синего кольца под слоем вазелинового масла в расчет не прини­мают.

Реакция на пероксидазу с вытяжкой из жабр (по А. М. Полуэктову)

В жабрах при жизни рыбы происходят окислительные процессы под воздействием фермента пероксидазы, содержащегося в гемоглобине крови. Оптималь­ным для действия пероксидазы является рН 4, 8. Гнилостные процессы в жабрах начинаются в ранних стадиях разложения рыбы, сопровождаются распадом крови и накоплением щелочных продуктов, вследствие чего сни­жается концентрация водородных ионов. Поэтому реак­ция на пероксидазу с вытяжкой из жабр свежей рыбы положительная, а в ранних стадиях разложения рыбы (при рН жабр 6, 7 и выше) становится отрицательной.

Ход реакции. Приготовляют вытяжку из жабр— 1 часть жабр на 10 частей воды при 15-минутной экстрак­ции. В пробирку берут 2 мл профильтрованной вытяжки, добавляют пять капель 0, 2%-ного спиртового раствора бензидина и две капли 1 %-ного раствора перекиси водо­рода.

– фильтрат их жабр свежей рыбы окрашивается в сине-зеленый цвет, переходящий в бурый;

– фильтрат из жабр недоброкачественной рыбы остается без изменений.

Люминесцентный анализ

В ультрафиолетовых лучах просматривают поверхность тела рыбы, свежие попереч­ные разрезы мускулатуры и водные экстракты (1: 10).

Содержание гемоглобина в экстрактах из мяса рыб незна­чительное, поэтому их подвергают люминесцентному ана­лизу без предварительного осаждения белков нагреванием.

Поверхностные покровы свежих рыб флуоресци­руют однородным матово-сероватым цветом с фиолетовым оттенком. Непигментированные места свежей рыбы имеют голубоватую окраску. Окраска спинных мышц на раз­резе — сиренево-голубоватого цвета, кровь в сосудах имеет темно-коричневое свечение.

– На поверхности рыбы подозрительной свежести имеются единичные интенсивно светящиеся и легко сдираемые точки или пятна зелено-желтого и голу- бого цвета. Они особенно заметны на жаберных покрыш­ках, приголовне, плавниках и боковых линиях. Мышцы на разрезе флуоресцируют тускло-сиреневым цветом с желтым оттенком, а кровь в сосудах — коричнево-оран­жевым цветом.

– На поверхности несвежей рыбы обнаруживают многообразные флуоресцирующие пятна и полосы различ­ных цветов — интенсивно желтого, зелено-желтого, ко­ричневого, черного и других. Мышцы на разрезе синевато-серые с желто-зеленоватым оттенком и с ярко-голубыми очагами.

– Окраска водных экстрактов из свежей рыбы фиолето­вая, в начальной стадии порчи — зелено-голубая и не­свежей рыбы — сине-голубая.

 

Контрольные вопросы:

1 Подготовить образцы рыбы к лабораторному исследованию.

2 Провести лабораторные исследования не консервированной и мороженой

рыбы.

3 Обосновать санитарную оценку исследуемой рыбы.

 

 

⇐ Предыдущая10111213141516171819Следующая ⇒

Поделиться:

Популярное:

1. I. Объект и средства исследования
2. II. Практические исследования
3. II. Специальные исследования
4. IX. ДАННЫЕ ЛАБОРАТОРНЫХ, ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ И КОНСУЛЬТАЦИИ СПЕЦИАЛИСТОВ
5. Анализ результатов экспериментального исследования по реализации программы педагогического сопровождения молодой семьи
6. АНАЛИТИЧЕСКИЕ НАУЧНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ НА АВТОМОБИЛЬНОМ ТРАНСПОРТЕ
7. АППАРАТУРА И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
8. Ардха-матсьендрасана —неполная царственная поза рыбы, или скручивание позвоночника
9. Биология – теоретическая основа медицины. Методы исследования и этапы развития биологии.
10. Биопсийный материал для гистологического исследования
11. Болезни и паразиты живой рыбы
12. Введение. Электрофизиологические исследования сердца