Клинические методы диагностики

Анамнез:

• для самцов — подтверждают фертильность по результатам предыдущих вязок;

• подтверждают корректность проведения вязки (сроки и количество вязок);

• для кошек — выясняют условия содержания и общее состояние здоровья (кормление, вакцинации, наличие паразитов);

• для кошек — устанавливают наличие/отсутствие вирусов кошачьей панлейкопении, кошачьей лейкемии или кошачьего инфекционного перитонита;

• для кошек — выясняют, состоялась ли вязка (на основании посткоитального поведения) и интервала до следующего эструса;

• для кошек — на основании концентрации прогестерона в плазме крови, измеренной через неделю после вязки, устанавливают, имела ли место овуляция;

• для кошек — интервал между течками менее 18 дней свидетельствует об отсутствии овуляции (вязка не состоялась, сроки или количество вязок выбраны некорректно), тогда как интервал продолжительностью около 40 дней указывает на произошедшую овуляцию, но на отсутствие оплодотворения (из-за бесплодия самца или заболевания самки, такого, как КГЭ, эндометрит) или на гибель эмбрионов.

Осмотр: повышенное содержание лейкоцитов в вагинальных выделениях указывает на наличие инфекции (необходимо помнить о повышении содержания лейкоцитов в конце эструса). Эндометрит выявляют на основании микробиологического исследования содержимого матки и цитологии эндометрия.

Дальнейшее обследование: КГЭ или некоторые анатомические дефекты матки обнаруживают с помощью УЗИ. Посредством лапаротомии выявляют патологию яичников и маточных труб.

Пробы концентрации прогестерона после окончания эструса указывают на следующие нарушения:

• отсутствие овуляции (снижение концентрации);

• недостаточность лютеиновой фазы (постоянно низкая концентрация).

Лечение

• если анамнез и первичный осмотр не выявят отклонений, ограничиваются наблюдением в течение контрольного цикла;

• для самцов: рекомендуется провести оценку фертильности и правильно организовать вязку;

• для самок: в начале проэструса проводят цитологию эндометрия и микробиологическое исследование содержимого матки, если соответствующее оборудование доступно;

• для исследования матки применяют контрастную рентгенографию;

• для подтверждения корректного выбора сроков вязки и наличия овуляции у сук определяют концентрацию прогестерона в плазме крови;

• для подтверждения беременности на 3–4 неделе после вязки проводят УЗИ.

Как правило, контрольный цикл завершается беременностью. Животные, у которых беременность не наступила или не сохранилась, нуждаются в дальнейшем обследовании, в том числе с помощью лапаротомии, позволяющей установить патологии маточных труб и провести биопсию матки.

Определение сроков искусственного осеменения у сук

При выборе даты осеменения необходимо учитывать, что для обеспечения фертильности в репродуктивном тракте самки должны одновременно присутствовать созревшие яйцеклетки и жизнеспособные сперматозоиды. В среднем созревание яйцеклеток происходит через 5 (4–8) дней после пика ЛГ, который обычно наблюдается в начале эструса (период, когда самка подпускает к себе самца). Таким образом, присутствие созревших яйцеклеток устанавливают по данным определения концентрации гормонов (ЛГ, прогестерона) в крови или на основании анамнеза, поведенческих и физических проявлений эструса. Нет сомнений, что измерение концентраций гормонов позволяет получить наиболее объективную картину.

Чтобы осеменение замороженной спермой привело к успеху, требуется особенно тщательный расчет, поскольку жизнеспособность сперматозоидов снижена (около 12–24 часов). При осеменении свежей спермой такой точности расчетов не требуется, поскольку жизнеспособность сперматозоидов значительно выше (4–7 суток при естественном или искусственном оплодотворении). Осеменение замороженной спермой предпочтительнее проводить через 5 дней после пика ЛГ или через 2 дня после того, как концентрация прогестерона в первый раз превысит уровень 30 нмоль/л (10 нг/мл). Тогда как осеменение свежей спермой обеспечивает хороший результат на любом этапе эструса, за исключением первых и последних дней.

Анамнез

Вероятное время оплодотворения устанавливают, определяя день оплодотворения во время предыдущего эструса (предыдущих эструсов). За точку отсчета принимают дату родов и определяют день оплодотворения обратным отсчетом. Продолжительность беременности у сук, считая от даты оплодотворения до родов, составляет приблизительно 60 дней. Таким образом, если вязка проводилась на 12 день цикла (начало проэструса — 1-й день), а роды состоялись через 64 дня, оплодотворение приходится на 16 день цикла. При наличии данных нескольких циклов рекомендуется зафиксировать варианты, характерные для конкретного животного. Такая информация позволяет рассчитать фертильный период текущего эструса, а также оптимальные сроки проведения анализа крови и вагинальных выделений.

Поведение

Положительные рефлексы (отведение хвоста, поднятие крупа в ответ на интерес со стороны самца или поглаживание в перинеальной области) обычно наблюдаются в период выброса ЛГ (первый день эструса) и в начале предовуляционного повышения концентрации прогестерона. Во времени проявления указанных признаков могут наблюдаться расхождения, для взрослых сук характерно их более раннее (т. е. до выброса ЛГ) проявление, чем для молодых сук.

Физические признаки

Вначале эструса цвет вагинальных выделений от красного (кровянистые выделения) меняется до желтоватого (слизистые). Однако у некоторых самок кровянистые выделения наблюдаются в течение всего эструса, тогда как у других выделения могут быть незначительными или отсутствовать как во время проэструса, так и в фазе эструса.

Характерным признаком эструса является набухание вульвы, при эндоскопии вагинальный эпителий выглядит подобно булыжной мостовой.

Табл. 3.6. Основания для определения времени пика ЛГ и первого дня эструса

Лабораторные исследования

Измерение концентрации прогестерона в плазме крови является наиболее распространенным лабораторным исследованием, применяемым для определения оптимальных сроков вязки. Одни тесты выявляют факт повышения концентрации прогестерона, другие позволяют определить количественные показатели. Концентрация прогестерона в сыворотке крови повышается до 6–12 нмоль/л (2–4 нг/мл) одновременно с пиком ЛГ и может служить индикатором этого всплеска. Овуляция происходит приблизительно через 2 суток (уровень прогестерона 12–30 нмоль/л, 4–10 нг/мл), а оплодотворение — на 2–3 день после овуляции (30–75 нмоль/л, 10–25 нг/мл или выше). Анализы крови для определения концентрации прогестерона повторяют каждые 2–3 дня, начиная с конца проэструса. Однако у некоторых сук в начале подъема концентрация прогестерона выходит на плато, наблюдающееся в течение нескольких дней, после чего начинает возрастать. Такая динамика свидетельствует о более поздней овуляции по сравнению с нормой.

Предовуляционный всплеск ЛГ продолжается в течение 24–48 часов. Измерить концентрацию ЛГ во время пика можно, но для этого требуются ежедневные анализы крови; метод не нашел практического применения.

Вагинальная цитология позволяет подтвердить наличие эструса, но не выявляет точного времени эндокринных (всплеска ЛГ) или физиологических процессов (овуляции, наличия созревших яйцеклеток). Безусловно, вагинальная цитология дает лучшую оценку времени овуляции в ретроспективе. На овуляцию, происходящую приблизительно за 6 дней до начала метэструса, указывает снижение количества поверхностных клеток в вагинальных выделениях (как минимум до 20 %).

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ

Преддверие влагалища, влагалище, шейка матки

Вагинальные выделения

Наличие вагинальных выделений устанавливают при осмотре вульвы. Цвет и характер выделений позволяют судить о причине их возникновения. Белая окраска выделений указывает на присутствие лейкоцитов, красная свидетельствует о присутствии крови, прозрачность указывает на практическое отсутствие слизи. Источником выделений могут являться половые органы или органы мочевыводящей системы.

Белесые выделения наблюдаются при следующих нарушениях:

• при препубертатной лейкорее, являющейся симптомом вагинита у молодых самок, который обычно проходит после первой течки;

• при вагините, связанном с наличием инородного тела во влагалище;

• при раннем метэструсе; выделения наблюдаются по окончании эструса (первый день метэструса) и в течение нескольких дней могут иметь гнойный характер;

• при пиометре, если открыта шейка матки;

• при цистите.

Красная окраска выделений указывает на:

• проэструс и обусловлена диапедезом крови из сосудов матки;

• эструс;

• персистенцию фолликулов;

• опухоли яичников, эстроген-секретирующие опухоли;

• трансмиссивную венерическую саркому;

• цистит;

• изъязвление влагалища в результате травмы;

• коагулопатию;

• инородное тело во влагалище;

• отслойку плаценты во время беременности;

• субинволюцию мест прикрепления плаценты.

Другие выделения:

• нормальные — прозрачные слизистые выделения коричневого оттенка;

• нормальные послеродовые — темно-зеленого оттенка;

• амниотическая жидкость — прозрачные водянистые выделения;

• при отсутствии родовой деятельности в связи с наличием единственного щенка — коричневые (со специфическим запахом);

• при мумификации плодов — густые, дегтеобразные, черные;

• при метрите — бурые.

Вагиноскопия

Вагиноскопию у сук проводят с помощью жесткого эндоскопа. Ауроскоп слишком короток для проведения исследования. Обследование шейки и краниальной части влагалища у сук связано с определенными трудностями, связанными с узостью краниальной части влагалища и с вентральным направлением шейки, кроме дорсального свода. Сужение репродуктивного тракта объясняется наличием поперечной постцервикальной складки, расположенной на дорсальной стенке влагалища на 2 см каудальнее шейки. Инспекцию шейки матки осуществляют с помощью узкого эндоскопа. Обследование в период метэструса и анэструса сопряжено с особенными трудностями, поскольку влагалище в это время (по сравнению с другими фазами цикла) становится уже, стенки его истончены. В течение эструса осмотру шейки могут препятствовать выраженные складки стенок влагалища.

Исследование влагалища у кошек затруднено в связи с его узостью, в частности на участке вестибуло-вагинального соединения.

Вагиноскопия позволяет обнаружить такие патологии влагалища, как перегородки, стриктуры, неоплазию и инородные тела, отобрать материал для биопсии, а также исследовать выделения, присутствующие в небольшом количестве в краниальной части влагалища, которые остаются на эндоскопе после его извлечения.

Вагинальная цитология

Применяется для определения фазы репродуктивного цикла, диагностирования воспалительных заболеваний влагалища и матки (при раскрытии шейки), трансмиссивной венерической саркомы.

О повышении концентрации эстрогенов можно судить по таким изменениям, как гиперплазия и гипертрофия вагинального эпителия, ороговение и эксфолиация его клеток. Вагинальная цитология позволяет выявить характерные изменения, служащие индикатором активности этого гормона. На стадиях цикла, протекающих на фоне минимальной эстрогенной активности (анэструс, метэструс, препубертатный период), в вагинальных выделениях у сук преобладают парабазальные клетки (фиг 3.1), которые имеют округлые очертания и низкий объем цитоплазмы по отношению к ядру. Под влиянием эстрогенов развивается гипертрофия эпителиальных клеток влагалища, затрагивающая мелкие промежуточные клетки (они крупнее парабазальных, с округлыми очертаниями и относительно более высоким соотношением ядра к цитоплазме; фиг. 3.1–3.3), крупные промежуточные клетки (полигональные клетки с неповрежденным ядром; фиг. 3.3) и поверхностные клетки (сходные с крупными промежуточными клетками, но, как правило, безъядерные или с пикнотичным ядром; фиг. 3.4). Число поверхностных ороговевших безъядерных клеток возрастает в фазе проэструса, сохраняется постоянным в течение эструса (фиг. 3.4) и резко уменьшается к моменту его окончания. Стремительное сокращение (более чем на 20 %) количества этих клеток свидетельствует о наступлении первого дня метэструса (фиг. 3.2). Характерно, что к этому моменту вагинальные выделения просветляются и уже не содержат ни органических остатков, ни окрашенной слизи. Повышенное содержание лейкоцитов может указывать на наличие инфекции, а присутствие аномальных клеток — на опухолевый процесс. Повышенное содержание нейтрофилов, наблюдающееся в начале метэструса (фиг. 3.1 и 3.5), считается нормой и не является признаком патогенной инфекции.

Фиг. 3.1.

^{В мазке вагинальных выделений у суки в первый день метэструса преобладают мелкие промежуточные клетки, имеется небольшое количество парабазальных клеток и нейтрофилов (окрашивание мазка Diff-Quik®)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.3.

^{Начало проэструса у суки. В мазке вагинальных выделений преобладают мелкие клетки, но присутствует небольшое количество крупных промежуточных клеток и эритроцитов (окрашивание мазка Diff-Quik®)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.2.

^{В мазке вагинальных выделений у суки во второй день метэструса преобладают мелкие промежуточные клетки, обнаруживается небольшое количество парабазальных клеток (окрашивание мазка модифицированным Schorr's trichrome)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.4.

^{Поверхностные клетки в мазке вагинальных выделений у суки в период эструса (окрашивание мазка Schorr's trichrome)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.5.

^{Начало метэструса у суки. В мазке вагинальных выделений присутствуют нейтрофилы и мелкие промежуточные клетки (окрашивание мазка Diff-Quik®)}^{(см. Приложение)}

Аналогичные цитологические изменения наблюдаются и у кошек, хотя менее выражены и не сопровождаются характерными кровянистыми выделениями на стадии проэструса.

Вагинальная микробиология

Бактерии, способные в некоторых случаях вызывать нарушения репродуктивного цикла, могут присутствовать в составе нормальной флоры. Благодаря раскрытию шейки матки на стадии проэструса и эструса бактерии из влагалища проникают в матку. Таким образом, бактерии, обнаруженные в матке в ходе исследования, проведенного на стадии проэструса/эструса, представляют собой скорее микрофлору краниального участка влагалища, чем собственно матки. На этом основании результаты микробиологического исследования необходимо интерпретировать с учетом других симптомов инфекции репродуктивного тракта, например, наличия гнойных выделений или повышенного содержания лейкоцитов в вагинальном мазке. В микрофлоре влагалища обнаруживается множество различных организмов, содержание которых существенно повышается на стадии проэструса и эструса, однако единственным микробом, присутствие которого расценивается как патология, требующая лечения, является Brucella canis.

Фиг. 3.6.

^{Трансцервикальная катетеризация с введением эндоскопа в матку суки породы грейхаунд в период эструса}

Фиг. 3.7.

^{Дегенеративные нейтрофилы в эндометриальном цитологическом образце, взятом у суки при пиометре (образец окрашен модифицированным Schorr's trichrome)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.8.

^{Большие скопления нормальных эпителиальных клеток эндометрия в эндометриальном цитологическом образце, взятом у суки грейхаунда в начале ме-тэструса (образец окрашен Diff-Quik®) (Воспроизведено с разрешения из Journal of Small Animal Practice (1998) 39, 2–9)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.9.

^{Эндометриальные клетки и макрофаги с пенистой цитоплазмой в эндометриальном цитологическом образце, взятом у суки грейхаунда за 46 дней до начала проэструса. Фаза анэструса у этой собаки продолжалась не менее 114 дней (образец окрашен Diff-Quik®) (Воспроизведено с разрешения из Journal of Small Animal Practice (1998) 39, 2–9)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.10.

^{Сперматозоиды и эпителиальные клетки эндометрия в эндометриальном цитологическом образце, взятом у суки грейхаунда через 24 часа после вязки, проведенной на 5 день эструса (образец окрашен модифицированным Schorr's trichrome)}^{(см. Приложение)}

Фиг. 3.11.

^{Дегенеративные эпителиальные клетки эндометрия в эндометриальном цитологическом образце, взятом у суки грейхаунда в период слущивапия эндометрия после родов. Характерно, что многие клетки имеют пикнотические ядра и вакуолизированную цитоплазму (образец окрашен Diff-Quik®)}^{(см. Приложение)}

Другие бактерии — это нормальная или условно патогенная микрофлора. Влияние этой микрофлоры на вероятность развития эндометрита в фазе эструса не выявлено. Требование, чтобы вагинальные выделения были «чистыми», т. е. не содержали бактерий, которое зачастую выдвигают владельцы племенных кобелей перед вязкой, представляется необоснованным, поскольку присутствие микрофлоры является нормой и не указывает на наличие патогенных инфекций. Кроме того, флора, сходная с вагинальной, присутствует и в препуции самца. Тем не менее в подобных случаях представляется целесообразным составить детальный анамнез репродуктивной активности, провести исследование влагалища и анализ выделений, после чего выдать следующее заключение: «На основании данных анамнеза, клинического исследования, микробиологического и цитологического анализов вагинальных выделений можно утверждать, что патогенные инфекции в репродуктивном тракте данной суки не обнаружены, полученные результаты свидетельствуют о нормальной фертильности».

Вагинальная рентгенология

Позитивная контрастная рентгенография применяется для выявления перегородок, стриктур и опухолей. Рентгеноконтрастное вещество может проникать в матку только на стадии проэструса, эструса и в послеродовой период.

Матка

⇐ Предыдущая 1 2 3 4 567 8 9 10 Следующая ⇒