Используется сыворотка диагностическая сальмонеллезная адсорбированная для РА.

⇐ ПредыдущаяСтр 6 из 7Следующая ⇒

Препарат представляет собой лиофилизированные иммунные адсорбированные сыворотки крови кроликов или баранов. Адсорбированные сыворотки содержат антитела, которые агглютинируют культуры сальмонелл, содержащие гомологичные О- и Н-антигены, и не агглютинируют культуры сальмонелл, содержащие гетерологичные О- и Н-антигены.

Назначение: серологическая идентификация бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на предметном стекле.

1. Препарат после вскрытия ампулы растворить в 1 или 2 мл 0, 9 % раствора натрия хлорида. Растворенные сыворотки могут храниться в пробирках, закрытых резиновыми пробками при температуре 7 градусов в течение 1 мес.

2. На предметное стекло нанести пипеткой каплю растворенной сыворотки, вблизи нее петлю культуры, выращенной в течение 18-24 ч на питательном скошенном агаре при температуре 37 градусов, растереть ее в сыворотке. Для определения О-антигена следует брать культуру с верхней части агара, а для определения Н-антигена-с нижней части агара.

3. Производится учет результатов:

++++ -отчетливый агглютинат при полном просветления жидкости

+++ -отчетливый агглютинат на фоне мутноватой жидкости

++ -незначительный агглютинат на фоне мутной жидкости

+ -незначительное количество агглютината на фоне мутной жидкости

-гомогенная мутная жидкость

Положительной считается реакция агглютинации интенсивностью не менее, чем +++.

8. Дифференциация(РА с сальмонеллезным бактериофагом).

9. Выдача результатов.

10.05 -работа в серологии- провела РПГА(реакция Хеддельсона при бруцеллезе).

Подготовка посуды к серологическому исследованию.

Обработка планшет: 1. Выдерживают в 1% растворе соляной кислоты не менее 1 ч.

2. Промывают в теплой мыльной воде, протирая каждую лунку тампоном с ватой.

3. Прополаскивают 20 раз в проточной воде.

4. Заливают дист. водой и оставляют до утра.

5. Утром сливают воду с планшет.

6. Подсушивают при комнатной температуре.

7. Перед постановкой реакции каждую лунку протирают тампоном с ватой, смоченной в физиологическом растворе.

Обработка посадок на дозатор

1. Уложить насадки в стеклянную емкость и залить 3-6% раствором перекиси водорода.

2. Поместить емкость с насадками в термостат, нагретый до температуры 50 градусов и выдержать при данной температуре в течении 3 ч.

3. Переложить насадки в емкость с дистиллированной водой, закрыть крышкой и выдержать при комнатной температуре 5 мин.

4. Высушить насадки при температуре 50 градусов 15 мин.

Проверила рН физиологического раствора с помощью индикаторной полоски(в норме рН=7, 2-7, 4)

Пластинчатый метод (реакция агглютинации на стекле)

1. Надела маску и перчатки, реакцию ставлю на обычном, тщательно вымытом, обезжиренном стекле.

2. расчерчиваю стекло на квадраты, величиной 4х4 см каждый.

3. Сверху записываю номера испытуемой сыворотки

4. В последующие квадраты разливаю микропипеткой испытуемую сыворотку в следующих дозах: 0, 04; 0, 02; 0, 01 мм, контроль сыворотки и антигена.

5. Сыворотку осторожно смешиваю с антигеном стеклянной палочкой, начиная с минимальной дозы.

6. Стекло слегка подогреваю над пламенем горелки так, чтобы происходило равномерное нагревание всей поверхности стекла. В случае положительной реакции в первые же минуты в каплях сыворотки с антигеном появляются хлопья.

7. Обработала стол дез.средством

8. Сняла маску и перчатки, вымыла руки.

Цифровой отчет

Подготовка сыворотки крови-6

РПГА-1

Реакций Хедельсона и Райта-1

Учет иммунологических реакций-1

Выдача результатов-1

Выписка протоколов-1

Двенадцатый день практики.

Санитарно-бактериологическое исследование воды.

Цель: Отбор проб водопроводной воды и посев по ГОСТу методом мембранных результатов. Отбор проб пищевых продуктов. Отбор проб воздуха в боксе на бактериальную обсемененность. Учет и выдача результатов.

Метод мембранных фильтров.

Первый день исследования

В воронку смонтированного и простерилизованного фильтровального прибора Зейтца наливают отмеренный объем исследуемой воды. С помощью насоса создают вакуум в приемном сосуде (обычно воду фильтруют через фильтры № 2 и 3). По окончании фильтрации стерильным или обожженным в огне пинцетом снимают фильтр и накладывают его на среду Эндо в чашке Петри так, чтобы поверхность с осевшими на ней микробами была обращена вверх (на одну чашку можно помещать 3-4 мембранных фильтра). Посевы инкубируют в термостате при температуре 37° С 18-24 ч.

Второй день исследования

Чашки с посевами (фильтрами) вынимают из термостата. Отсутствие подозрительных колоний дает право дать отрицательный ответ. Учету подлежат все красные и розовые колонии с металлическим блеском или без него. Из выросших колоний делают мазки, окрашивают по Граму (рис. 56).

Рис. 56. Определение коли-индекса воды методом мембранных фильтров

При наличии грамотрицательных палочек ставят пробу на оксидазу. Положительная оксидазная проба дает право дать отрицательный ответ. При отрицательной оксидазной пробе производят посев на полужидкую среду с глюкозой и индикатором или на среду ГПС с бродильными трубками - для выявления ферментации углевода до кислоты и газа. При наличии кислоты и газа вычисляют коли-индекс. Например, на всех фильтрах, находящихся на среде Эндо, выросло 3 колонии, пропущено через фильтр было 300 мл воды.

Расчет. 300 мл - 3 колонии

100 мл - х

х = 1; коли-индекс 1

Отбор пробы воды

Для отбора проб воды используют специально предназначенную для этих целей одноразовую посуду или емкости многократного применения, изготовленные из материалов, не влияющих на жизнедеятельность микроорганизмов. Емкости должны быть оснащены плотно закрывающимися (силиконовыми, резиновыми или из других материалов) пробками и защитным колпачком (из алюминиевой фольги, плотной бумаги). Многоразовая посуда, в том числе пробки, должны выдерживать стерилизацию сухим жаром или автокла-вированием.

Пробу отбирают в стерильные емкости с соблюдением правил стерильности. Емкость открывают непосредственно перед отбором, удаляя пробку вместе со стерильным колпачком. Во время отбора пробка и края емкости не должны чего-либо касаться. Ополаскивать посуду запрещается.

При исследовании воды из распределительных сетей отбор проб из крана производят после предварительной его стерилизации обжиганием и последующего спуска воды не менее 10 минут при полностью открытом кране. Если отбирают воду после обеззараживания химическими реагентами, то для нейтрализации остаточного количества дезинфектанта в емкость, предназначенную для отбора проб, до стерилизации вносят натрий серноватистокислый в виде кристаллов или концентрированного раствора из расчета 10 мг на 500 мл воды.

После наполнения емкость закрывают стерильной пробкой и колпачком. Отобранную пробу маркируют и сопровождают актом отбора проб воды с указанием названием пробы, места забора, даты (год, месяц, число, час), цель исследования, куда направляется проба для исследования, подпись лица, взявшего пробу.

⇐ Предыдущая 1 2 3 4 567 Следующая ⇒