Часть 2. Качественное исследование питательных сред

Биуретовая реакция: При добавлении 5 капель крепкой азотной кислоты к 10 мл профильтрованного прозрачного 1 % раствора пептона не должна образовываться муть, нерастворимая при нагревании до 100 º. К 1 мл 5% раствора пептона добав­ляют 2 мл 25% раствора едкого натра, смешивают, добавля­ют 3 капли 5% раствора медного купороса и взбалтывают; раствор дает красно-фиолетовую окраску.

При полном гидролизе белка наблюдают розовое окрашивание (пептоны) при наличии нерасщепленного белка - фиолетовое окрашивание. Биуретовая реакция присуща целой молекуле белка и продук­там его гидролиза (альбумозы, пептоны).

Результаты:

 

Ксаптонротеиновая реакция. К 5 мл перевара или пита­тельной среды добавляют 0, 5-1 мл азотной кислоты, при этом обычно образуется осадок, который снова растворяется при нагревании (кипятят 2 минуты); жидкость и осадок окра­шиваются в желтый цвет. После охлаждения добавляют не­много аммиака или едкого натра; цвет раствора вместо желтого становится оранжевым. Реакция основана на содержании в белке бензольного ядра и указывает на присутствие в среде триптофана, тирозина или фенилаланина.

Результаты:

 

Реакция на свободный триптофан.Разводят исследуемый перевар 1: 5, 1: 10, 1: 20, 1: 30, 1: 40, 1: 50, разливают по 5 мл в пробирки и добавляют в каждую из них несколько ка­пель бромной воды; появление красного окрашивания свиде­тельствует о наличии триптофана.

Результаты:

 

Определение степени чистоты продажного пептона.

Проблема химического контроля пептона сложна и в настоящее время не разрешена. Для определения чистоты продажного пептона 5-10 г пептона растворяют в 50 мл воды, подкисляют 2 каплями уксусной кислоты, прибавляют порошкообразный хлористый аммоний до насыщения (остается избыток нерастворимой соли), фильтруют и исследуют жидкость на истинные пептоны при помощи биуретовой реакции. Оставшийся на фильтре осадок промывают в насыщенном растворе хлористого аммония, дают стечь. Жидкость отжимают между листами фильтровальной бумаги и снова растворяют в нескольких мл воды. В этом растворе определяют отличительные признаки первичных и вторичных альбумоз.

Результаты:

 

Колориметрический метод определения содержания пепто­нов. Предварительно готовят колориметрическую шкалу. Для этой цели 0, 5 г пептона Витте растирают стеклянной палочкой в химическом стаканчике с 0, 5 мл 30% раствора едкого натра и 2—3 мл дистиллированной воды, смывают дистиллированной водой, переводя смесь в мерную колбу, и доводят до 100 мл дистиллированной водой. Из приготовленного таким образом раствора готовят ряд стандартных пробирок по следующей схеме:

Ингредиенты	№ пробирки
0.5 % раствор пептона в мл	0, 2	0, 4	0, 6	0, 8	1, 0	1, 2	1, 4	1, 6	1, 8	2, 0
Дистиллированная вода в мл	5, 8	5, 6	5, 4	5, 2	5, 0	4, 8	4, 6	4, 4	4, 2	4, 0
10 % раствор едкого натра в мл
1 % раствор медного купороса в каплях
Обозначение % пептона на стандартной пробирке	0, 1	0, 2	0, 3	0, 4	0, 5	0, 6	0, 7	0, 8	0.9	1, 0

Исследуемый перевар или питательный бульон предвари­тельно разводят в 2—10 раз дистиллированной водой, в зависимости от содержания в нем пептона. Для определения в пробирку наливают 1 мл исследуемого перевара или питательного бульона, 1 мл 10% раствора едкого натра, 5 мл дистиллированной воды, 4 капли 1 % раствора медного купороса и сравнивают по цвету на белом фоне или в компараторе Уальполя с пробирками стандартного ряда.

Результаты:

 

 

ВОПРОСЫ

к зачету (в форме письменного опроса);

Раздел «Виды, использование и регенерация питательных сред»

1. Значение питательных сред для народного хозяйства

2. Посевные и основные ферментационные производственные питательные среды.

3. Совершенствование и модификация технологии культивирования микроорганизмов с целью повышения урожая биомассы микробов или максимизации накопления целевого продукта.

4. Проблема феномена стационарной фазы при культивировании питательных сред и варианты ее решения.

5. Применение биомембранных методов переработки сырья при направленном регулировании компонентного состава питательных сред.

6. Совершенствование технологических процессов культивирования микроорганизмов: применение биостимуляторов, гормональных препаратов, адаптация и модификация штаммов микроорганизмов, оптимизация технологических режимов и т.д.

7. Актуальность исследования продуктов культивирования питательных сред.

8. Влияние условий культивирования на питание и метаболизм микроорганизмов.

9. Питание. Роль ферментов в метаболизме микроорганизмов.

10. Действие гидролитической ферментативной системы в процессе переваривания пищи. Проникновение низкомолекулярных соединений через клеточную мембрану в протоплазму клетки.

11. Особенности процессов ферментолиза у микроорганизмов.

12. Влияние физических и биологических факторов на метаболизм микроорганизмов.

13. Значение воды и особенности ее использования в микробиологическом синтезе.

14. Влияние температуры на ход микробиологического синтеза. Пастеризация и стерилизация.

15. Активная кислотность (рН) и окислительно-восстановительный потенциал (Еh).

16. Минеральные вещества и осмотическое давление.

17. Энергетические и ростовые вещества питательной среды.

18. Факторы роста и биостимуляторы

19. Технология приготовления питательных сред для культивирования микроорганизмов.

20. Классификация питательных сред.

21. Особенности гидролиза белкового сырья.

22. Среда для культивирования листерий.

23. Среда для культивирования сальмонелл.

24. Питательная среда для культивирования пастерелл.

25. Среда для культивирования коли-бактерий.

26. Среда для культивирования бифидо-бактерий (КД-5).

27. Питательные среды для микробиологического синтеза

28. Синтетические питательные среды в синтезе микроорганизмов.

29. Факторы роста и развития организмов при приготовлении питательных сред.

30. Источники углерода и азота, как основных компонентов питательных сред.

31. Влияние температуры и аэрации на качественные изменения питательной среды.

32. Характеристика кукурузного экстракта, как дешевого сырья для микробиологического синтеза.

33. Соевая мука, как источник белковых веществ.

34. Минеральные азотосодержащие вещества в питательных средах.

35. Биосинтез лизина.

36. Биосинтез глутаминовой кислоты (глутамат натрия).

37. Биосинтез триптофана.

38. Питательные среды для синтеза антибиотиков

39. Антибиотики и их применение.

40. Препараты тетрациклина.

41. Биовит и терравит.

42. Препараты бацитрацина.

43. Низин.

44. Питательные среды для синтеза органических кислот

45. Питательная среда для синтеза лимонной кислоты.

46. Питательная среда для синтеза уксусной кислоты.

47. Питательная среда для синтеза молочной кислоты.

48. Питательные среды для синтеза витаминов.

49. Питательная среда для синтеза витамина В₁₂ .

50. Питательная среда для синтеза витамина В₂ (рибофлавина).

51. Питательная среда для синтеза витамина С (аскорбиновой кислоты).

52. Регулирование компонентного состава биологических жидкостей с помощью биомембранных технологий.

 

СПИСОК РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Основная литература

Баснакьян И.А. Культивирование микроорганизмов с заданными свойствами.. М.: Медицина. –1992. –192 с.

Сидоров М.С., Корнелаева Р.П. Микробиология мяса и мясопродуктов. М.: Колос. –1996. –240 с.

Тутов И.К., Ситьков В.И. Основы биотехнологии ветеринарных биопрепаратов. Ставрополь: 1997. –253 с.

Дополнительная литература

Безбородов А.М. Биосинтез биологически активных веществ микроорганизмами. М.: Медицина. –1969. –246 с.

Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М.: Медицина. – 1973. – 456 с.

Бурьян Н.И., Тюрина Л.В. Микробиология виноделия. М.: Пищевая промышленность. –1979. –272 с.

Воробьева Л.И. Промышленная микробиология. М.: Изд-во МГУ. -1989. –294 с.

Залашко М.В., Залашко Л.С. Микробный синтез на молочной сыворотке. Минск: Наука и техника. –1976. –274 с.

Иванов В.Н. Энергетика роста микроорганизмов. Киев: Наукова думка. –1981. –140 с.

Коротяев А.И. Механизмы саморегуляции бактериальной клетки. М.: Медицина. –1973. –272 с.

Козлов Ю.А. Питательные среды в медицинской биологии. М.: МЕДГИЗ – 1950 – 252 с.

Месробяну Л., Пуэнеску Э. Физиология бактерий. Бухарест: Меридиане. –1963. –807 с.

Мосичев М.С., Складнев А.А., Котов Б.В. Общая технология микробиологических производств. М.: Легкая и пищевая промышленность. –1982. – 264 с.

Основы общей биологии. Пер. с нем. Колесниковой Г.С. и Фролова Ю.М. Под общей ред. Либберта Э. М.: Мир. –1982. –440 с.

Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.: Мир. –1978. –331 с.

Пехов А.П. Генетика бактерий. Изд. 2. М.: Медицина. –1977. –408 с.

Практикум по физико-химическим методам в биологии. М.: Изд-во МГУ. –1981. –240 с.

Руководство по вакцинному и сывороточному делу. Под ред. Бургасова П.Н. М.: Медицина. –1978. –440 с.

Уэбб Ф. Биохимическая технология и микробиологический синтез. Пер. с англ. Швалева П.Е. М.: Медицина. –1969. –560 с.

 

⇐ Предыдущая123456

Поделиться:

Популярное:

1. DVD - часть у меня, часть у знакомых
2. I. СИСТЕТЕХНИЧЕСКОЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА ПРОИЗВОДСТВА ЭЛЕКТРОННЫХ СРЕДСТВ
3. I. Теоретические основы использования палочек Кюизенера как средство математического развития дошкольников.
4. I. Теоретические основы экономического воспитания детей старшего дошкольного возраста посредством сюжетно-ролевой игры
5. II Секретариат по вопросам окружающей среды
6. II Физические загрязнения окружающей природной среды
7. II этап, средняя — старшая группы
8. II. ОЩУЩЕНИЯ. ИССЛЕДОВАНИЕ ОЩУЩЕНИЙ ПСИХОФИЗИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
9. IV.1. Исследование самооценки
10. IX. ОБРАЩЕНИЕ КАК СРЕДСТВО АДРЕСАЦИИ
11. VIII. Какую массу бихромата калия надо взять для приготовления 2 л 0,02 н. раствора, если он предназначен для изучения окислительных свойств этого вещества в кислой среде.
12. XVIII. НЕВЕРБАЛЬНЫЕ СРЕДСТВА И КОМПОНЕНТЫ КОММУНИКАЦИИ