Физ-хим свойства и методы фракционирования белков

Денатурация - любое негидролитическое изменение структуры белка, проводящее к изменению его биолог. и физико-хим. св-тв. Факторы: физ.(t, давление, УЗ); хим.(кислоты, щелочи, тяжMe); био(протеолитические ферменты).
Амфотерность- проявление молекулой белка кислотных и основных свойств).
Изоэлектр.точка-рН среды, при котором суммарный заряд белка равен 0.
Растворимость белка-способность белка образовывать с др.вещ-вами однородные системы-растворы в которых белок нах-ся в виде отдельных молекул или частиц. (Зависит от АК состава, рН среды, наличия соли).
Высаливание-р-ть белков сильно зависит от конц.солей; ↓растворимости белка при ув.конц.соли относительно той её величины, при которой растворимость белка была max.
Диализ-метод очистки белков от нозкомолек.примесей с использ.полупрониц.мембран.
Электрофорез-основан на разлив.в подвижности молекул в эл.поле(различия в заряде).
Хроматография-метод разделения смесей в-тв или частиц, основанный на различиях в скоростях или перемещ. в системе несмеш. и движ. относительно друг друга фаз.

Гликолиз

Гликолиз – это последовательность ферментативных реакций, приводящих к превращению глюкозы в пируват + АТФ.Если О2 мало = ПВК→лакттат. Анаэробный гликолиз – сложный ферментативный процесс распада глюкозы, протекающий в тканях человека и животных без потребления кислорода. Конечным продуктом-молочная кислота. 11 ферментов, протекает в цитоплазме клетки.

АТФ затрачивается: 1 и 3 ре-я

2АТФ обарз: 7 и 10 ре-я

2НАДН обрз 6 реак-я (=6АТФ)

Затрат НАДН 11 ре-я

Всего 8 АТФ

Ферменты: гексокиназа+АТФ→глюк-6-Р-изомераза→6-фосфофрукткиназа+АТФ→альдолаза→триозофосфатизомраза→глицеральдегидфосфатдегидрогеназа+НАД+Н2РО4→фосфоглицераткиназа+АДФ+магний→фосфоглицеромутаза→енолаза-Н2О→пируваткиназа+магний→лактатдегидрогеназа+НАДН2

Био значение = образ АТФ. На первых стадиях гликолиза затрачиваются 2 молекулы АТФ (гексокиназная и фосфофрук-токиназная реакции). На последующих образуются 4 молекулы АТФ (фосфоглицераткиназная и пируваткиназная реакции). Таким образом, энергетическая эффективность гликолиза в анаэробных условиях составляет 2 молекулы АТФ на одну молекулу глюкозы., Лимитирующей скорость гликолиза, является фосфофруктокиназная. Вторая реакция, лимитирующая скорость и регулирующая гликолиз – гексокиназная реакция. Кроме того, контроль гликолиза осуществляется также ЛДГ и ее изоферментами.
В тканях с аэробным метаболизмом (ткани сердца, почек и др.) преобладают изоферменты ЛДГ1 и ЛДГ2 (см. главу 4). Эти изоферменты ↓пирувата = нет молочной кислоты = окис ПВК (точнее, ацетил-КоА) в цикле трикарбоновых кислот)

Система фибринолиза.

Система фибринолиза
Это ферментная система, действие которой заключается в деградации (лизисе) фибрина, реканализации сосудов и восстановлении кровотока. Она препятствует образованию диссеминированного тромбоза и активизируется одновременно с системой свёртывания и системой антикоагулянтов.
Основные компоненты: Плазминоген – профермент, из которого образуется белок плазмин, расщепляющий фибрин. Активируется активаторами плазминогена (PA) и фактором XIIа.

2. Активаторы плазминогена тканевого типа (t-PA, tissue plasminogen activator) и урокиназный (u-PA, урокиназа, urokinase plasminogen activator) – ферменты (сериновые протеазы), превращающие плазминоген в плазмин.тканевой активатор плазминогена (t-PA) выделяется эндотелием, моноцитами, мегакариоцитами,урокиназный активатор плазминогена (u-PA) продуцируется эпителиальными клетками почечных протоков, юкстагломерулярными клетками, фибробластами, макрофагами, эндотелиоцитами.

3. Фактор XII (фактор Хагемана) – контактный фактор, активатор плазминогена и прекалликреина.

4. Прекалликреин – контактный фактор, фактор Флетчера, профермент калликреина, катализирующего образование кининов, но для этого должен сначала активироваться фактором Хагемана (ф.XIIа).

5. Высокомолекулярный кининоген (ВМК, фактор Фитцжеральда) – в кровотоке находится в комплексе с фактором XII, рецептором прекалликреина.

Ключевым ферментом= плазмин, гидролизующий фибрин до растворимых продуктов. Активаторы превращения плазминогена в плазмин образуются сосудистой стенкой (внутренняя активация) или тканями (внешняя активация).
3. Ингибиторы фибринолиза:
- PAI-1 (plasminogen activator inhibitor – 1);- PAI-II;- α2-антиплазмин;- α2-макроглобулин- α1-антитрипсин
Активация по внешнему пути =ТПА, из эндотелия сосудов. + на поверхности фибрина, или внутри сгустка =тройной комплекс (плазминоген-фибрин-ТПА). Урокиназане связывается с фибрином, но фиксируется на поверхности различных клеток, имеющих рецепторы для плазминогена =>активного плазмина на эндотелии и различных форменных элементах крови, участвующих в формировании тромба.
Внутренний путь плазминоген в плазмин- ускоряет активацию фактора Хагемана и прекалликреина, =ускорению фибринолиза и свёртывания. Плазмина из плазминогена происходит внутри фибринового сгустка.
Фибринолиз ингибируется соединениями, которые связывают плазмин или тормозят активацию плазминогена. Основным ингиб= PAI-1, продуцируется и секретируется эндотелиоцитами, инактивирует как тканевой, так и урокиназный активаторы плазминогена.– α2-антиплазмин. Он синтезируется в печени , + с плазмином и  фибрином, Разрушая плазмин, α2-антиплазмин =в плазме свободный плазмин практически не встречается. Плазмин+ с α2-антиплазмином, теряет способность разрушать фибрин, а фибрин, +становится  устойчивым к действию фибринолитических агентов. Плазмин, + фибрином, инактивируется α2-макроглобулином. α2-макроглобулин нейтрализует плазмин, если не + с α2-антиплазмином. К ингибиторам =α1-антитрипсин, α1-химотрипсин, интер-1α-трипсин, антитромбин-III, интер-α-глобулин, ингибитор фактора Хагемана и др.

Билет №4

⇐ Предыдущая12345678910Следующая ⇒

Поделиться: