Опыт 1. Стадии фагоцитоза при воспалении

⇐ ПредыдущаяСтр 3 из 8Следующая ⇒

Морской свинке или крысе за сутки, лучше за 36-40 часов до занятия в брюшную полость вводят 8-10 мл стерильного мясопептонного бульона (содержание пептона – 1%), вызывающего асептическое воспаление брюшины. При этом в перитонеальном экссудате скапливается большое количество «свободных» макрофагов. За час да занятия в брюшную полость для разжижения экссудата вводят 5 мл изотонического раствора хлорида натрия (подогретого до 38º С). Во время занятия животному (под гексеналовым наркозом – 0, 3мл 3% раствора на 100г массы тела) выстригают шерсть по срединной линии живота кзади от пупка, кожу обрабатывают настойкой йода. Далее в брюшную полость животного вводят 3 мл 3% взвеси птичьих эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия, подогретом до 38º С(птичьи эритроциты, имеющие ядро - естественную «метку», служат объектом фагоцитоза).

Через 15 минут у подопытного животного ножницами разрезают кожу живота по срединной линии кзади от пупка; в месте разреза пастеровской пипеткой прокалывают брюшину и в пипетку набирают около 1мл экссудата. Из экссудата готовят фиксированный мазок и изучают его под микроскопом.

Каплю экссудата помещают на предметное стекло и шлифованным ребром другого стекла делают широкий во всю длину стекла мазок. Высохший мазок помещают на решетку ванночки и заливают краской азур-эозин на 2 минуты, добавляют равное количество дистиллированной воды, и мазок докрашивают в течение 10-15 минут. Далее мазок промывают водопроводной водой и высушивают полосками фильтровальной бумаги.

Окраску мазка можно производить по Романовскому-Гимзе. При этом высохший мазок предварительно фиксируют в жидкости Никифорова (15-20 минут) и окрашивают краской Романовского в течение 20-15 минут.

Высушенный мазок (независимо от способа краски) изучают под микроскопом с иммерсионной системой при большом увеличении (объектив 90). Определяют стадии фагоцитоза и зарисовывают их.

Обсуждение результатов, заключение делают, ответив на следующие вопросы:

I. Какие стадии фагоцитоза наблюдались в исследованных мазках?

2. Опишите основные механизмы каждой из стадий фагоцитоза.

Опыт 2. Амилолитическая активность гнойного экссудата.

В шесть пронумерованных пробирок, кроме первой, добавить в возрастающем количестве капель (2, 4, 6, 8, 10) отстоя гноя. Затем внесением в пробирки изотонического раствора хлорида натрия выравнивают объем жидкости.

Реактивы	№ пробирки
Реактивы	1	2	3	4	5	6
- 0, 25% раствор крахмала в мл - Отстой гноя в каплях - Изотонический раствор (в каплях)

Пробирки встряхивают и ставят в термостат при температуре 37^о на 15 минут. Затем во все пробирки прибавляют по одной капле раствора Люголя, взбалтывают содержимое и по его окраске судят об амилолитической активности гнойного экссудата.

Обсуждение результатов опыта ведут, ответив на следующие вопросы:

1. Каков состав гнойного экссудата?

2. Каково происхождение ферментов в очаге гнойного воспаления?

3. Каково значение ферментов в патогенезе воспаления?

ЛИТЕРАТУРА:

1. Патофизиология. В 3т.: учеб. для студ. высш. учеб. заведений / Под ред. А.И. Воложина, Г.В. Порядина. Т.1. – М.: Издательский центр «Академия», 2007. – С.56-93, 141-151.

2. Патологическая физиология. Учебник / Под редакцией А.Д. Адо и др. –М.: Триада-Х, 2000.- С.16-48, 181-184, 195-199.

3. Лекции.

4. Патологическая физиология: общая патофизиология: учебное пособие: часть I /сост. И.Г. Брындина, Д.М. Михайлов, С.А. Лукина [и др.]; под ред. проф. С.А. Лукиной. – Ижевск, 2015. – С. 18-23.

5. Патофизиология: учебник: в 2 т. / под ред. В.В. Новицкого, Е.Д. Гольдберга, О.И. Уразовой. - 4-еизд., перераб. и доп. -ГЭОТАР-Медиа, 2009. - Т. 1. - 848 с. https: //studfiles.net/preview/6205013/

6. Патофизиология. Клиническая патофизиология: учебник: в 2 т. / под ред. проф. В.Н.Цыгана. – СПб: СпецЛит, 2018. – Т.1: Патофизиология. - 430с.

Тема 4. Гипоксия.

Цель: изучить патогенетические особенности основных видов гипоксий, механизмы адаптации, нарушения функций организма при гипоксиях.

Учебные задания:

Вопросы для проработки учебного материала:

1. Гипоксия, определение понятия.

2. Классификация гипоксических состояний.

3. Этиология и патогенезотдельных типов гипоксий.

4. Нарушение обмена веществ, физиологических функций при гипоксии.

5. Экстренные и долговременные адаптивные реакции при гипоксии, их механизмы.

Практическая работа:

Опыт 1.Определение индекса Скибинского

Индекс Скибинского используют для интегративной оценки устойчивости кардиореспираторной системы к гипоксии.

Методика определения индекса Скибинского.

Для его расчета у пациента определяют следующие показатели:

- жизненную емкость легких спирографически (ЖЕЛ, в мл)

- длительность задержки дыхания (проба Штанге, в сек)

- частоту сокращений сердца (ЧСС, в мин)

- массу тела (в кг)

Индекс Скибинского (ИС) находят по формуле:

ИС = ЖЕЛ * время задержки дыхания на вдохе / ЧСС * масса тела

ИС вычисляется в баллах, где 1 балл = мл х сек

сокр. в мин х кг

Непосредственно на практическом занятии у пяти юношей и пяти девушек определяют ЖЕЛ, частоту пульса (не менее двух раз), массу тела, проводят пробу Штанге. Рассчитывают индекс Скибинского (в баллах) и находят его среднюю величину у мужчин и у женщин 19-22 лет. Обсуждают возможное влияние нарушений системы внешнего дыхания, сердца, сосудов, крови на исследуемый показатель. Делают заключение о практической значимости определения индекса Скибинского у здорового или больного человека.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Патофизиология. В 3т.: учеб. для студ. высш. учеб. заведений / Под ред. А.И. Воложина, Г.В. Порядина. Т.2. – М.: Издательский центр «Академия», 2007. – С. 104-119.

2. Патологическая физиология. Учебник / Под редакцией А.Д. Адо и др. –М.: Триада-Х, 2000.- С. 278-289.

3. Лекции.

⇐ Предыдущая 1 234 5 6 7 8 Следующая ⇒

Последнее изменение этой страницы: 2019-10-05; Просмотров: 135; Нарушение авторского права страницы