Забор патологического материала и исследование на гонококки п трихомонады

⇐ ПредыдущаяСтр 3 из 4Следующая ⇒

Установление этиологического диагноза гонореи возможно только при обна-руженин возбудителя в патологическом отделяемом из уретры. Материал на об-наружение гонококков берется из уретры не ранее 2-х часов после последнего мо-чеиспускания. При свежей острой гонорее с помощью салфетки удаляется сво-бодное отделяемое из уретры. С помощью ложки Фолькмана или одноразового зонда путем аккуратного введения их в уретру на глубину I см проводится забор материала. Полученный материал наносится на предметное стекло и равномерно размазывается по его поверхности. Приготовленный мазок окрашивают по спосо-

У Грама. Для бактериологического исследования производят посев материала на специальную среду.

16. Взятие материала и исследование на бледную трепонему.

Отделяемое шанкра, эрозивной папулы наносят на чистое и тонкое предметное стекло, смешав с каплей физиологического раствора. Важно, чтобы стекло было тонким и чистым, а серум был без примеси гноя, корок, чешуек и крови. Материал накрывают тонким и тщательно очищенным покровным стеклом, так чтобы оно не плавало. Чем меньше слой жидкости, тем лучше. Микроскопируют с помощью специального темнопольного конденсора. При этом иммерсионное масло наносят на верхнюю линзу конденсора, поднимают до соприкосновения с нижней поверхностью предметного стекла с исследуемым препаратом. Настраивают свет и резкость. Препарат напоминает звездную ночь с активным движением детрита. Бледные трепонемы под увеличением 10x60 выглядят как тончайшие спиралевидные нити, плавно двигающиеся по току жидкости, совершающие плавные движения вокруг своей оси, сгибательные и маятникообразные. Бледных трепонем. Как правило, мало. Их легче найти на периферии препарата по направлению движения испаряющейся жидкости. Данный способ простой и, пожалуй, является наиболее надежным. Бледную трепонему рассматривают в живом состоянии, что позволяв дифференцировать ее и другие виды спирохет.

Взятие материала. Для бактериологического исследования на бледную трепонему необходима тканевая жидкость, так как трепонемы располагаются в тканевых щелях, вокруг лимфатических и кровеносных сосудов, между волокнами соединительной ткани, в стенках и просветах лимфатических капилляров. Исследованию на бледную трепонему подлежат все высыпные элементы, подозрительные на первичный и вторичный сифилис (эрозивные и язвенные шанкры, мокнущие « эрозивные папулы, кондиломатозные образования, трещины и эрозии слизистых оболочек рта и половых органов).

С целью получения материала для исследования на бледную трепонему чаще пользуются методом раздражения высыпного элемента, если он имеет склонность к мацерации. При этом необходимо предварительно освободить поверхность язвочки, эрозии или папулы от корочек, возможного загрязнения применявшимися пациентом мазями или присыпками. Делают это осторожно, чтобы не вызвать излишнего кровотечения, пользуясь стерильными ватно- марлевыми тампонами, смоченными изотоническим раствором хлорида натрия. Очищенную поверхность, подлежащую исследованию, просушивают тампоном и при помощи платиновой лопаточки или вольфрамовой петли осторожно массируют у края до тех пор, пока не появится тканевая, слегка опалесцирующая, жидкость, из которой готовят препарат для исследования. Из немацерированных высыпных элементов материал для исследования на бледную трепонему получают методом скарификации при помощи скальпеля. Однако из-за значительной примеси крови к тканевой жидкости и трудности в связи с этим нахождения в препарате бледных трепонем этот метод не получил широкого распространения.

17. Приготовление темного поля по Архангельскому. В 1934 г М П. Архангельским было предложено использовать обычный конденсор микроскопа, вставляя в него кружок черной бумаги. Для вырезывания кружка удобно пользоваться бумагой, в которую упаковывают светочувствительные фотопластинки и фотобумагу. Кружок имеет четыре выступа, которые, упираясь в металлическую оправу линзы, обеспечивают центральное положение кружка и равномерный просвет, щели вокруг него. Правильный подбор величины щели, окружающей бумажный кружок, имеет существенное значение. Следует вывернуть нижнюю линзу конденсора и вырезать кружок черной бумаги по величине этой линзы, а затем, оставляя выступы, срезать с краев полоски в 2—2, 5 мм шириной. Нижняя линза вместе с кружком на ней ввертывается в конденсор. При малой величине щели будет проходить недостаточно света, и все поле будет непроницаемо темным. При чрезмерно большой величине Щели будет проходить много света, поле будет светлосерым и на нем нельзя отчетливо наблюдать живые микроорганизмы.

В качестве источника света можно пользоваться осветителем с электрической лампочкой в 150 ватт. Более пригодны электрические лампы с нитью накала в виде спирали, а не в виде звезды, так как сосредоточенный источник света, давая меньшее рассеивание, позволяет легче установить необходимое темное поле. Для приготовления препарата лучше пользоваться тонкими (1, 0—1, 2 мм) предметными и ровными покровными стеклами (0, 2 мм). Правильный подбор толщины предметного стекла имеет существенное значение для получения качества изображения в темном поле. Чистота и сохранность поверхности стекол является необходимым условием.

Дефекты поверхности стекла: матовость, царапины, незаметные для глаза и не имеющие значения при работе со светлым полем, портят темное поле. Поэтому необходимо отобрать новые, не бывшие в употреблении предметные стекла, обмыть их водой с мылом, хорошо прополоскать в проточной воде, а затем досуха вытереть марлей или чистым полотенцем, не бывшим после стирки в употреблении.

В качестве пробного испытательного материала можно пользоваться зубным налетом, небольшое количество которого размешивается в 0, 5—1, 0 мл физиологического раствора. На всех стеклах наносятся препараты этой жидкости, которые просматриваются в темном поле. Хорошие стекла, дающие ясную картину темного поля, отбираются для работы. Для получения темного поля применяется только плоское зеркало микроскопа, так как пучок световых лучей, идущих в конденсор, должен быть параллельным.

Для соединения предметного стекла с конденсором применяется иммерсионное масло, которое наносят на конденсор.

Предметное стекло наклонно постепенно опускается на конденсор так, чтобы капля масла, центр препарата и центр конденсора совпали. Это делается для того, чтобы избежать попадания мелких пузырьков воздуха между конденсором и предметным стеклом, что нарушает видимость темного поля. Предметное стекло закрепляется клеммой.

Объектив опускается возможно ниже, почти до самого покровного стеклышка. Затем, глядя в окуляр, начинают поворачивать зеркало до появления хотя бы самого незначительного просветления. После этого начинают приподнимать тубус, пока не появятся более четко видимые световые точки и пятна. Затем опять приступают к регулировке освещения зеркалом до тех пор, пока картина темного поля окончательно прояснится и станут отчетливо видны яркоосвещенные различные объекты, находящиеся в исследуемом препарате. Пользуются объективом сухой системы х40. Если необходимо рассмотреть микроб или частицу в более увеличенном виде, то можно заменить окуляр 10 окуляром 15. После каждого исследования необходимо сейчас же вынуть и обтереть конденсор, иначе масло просочится внутрь и загрязнит линзы.

Биопсия кожи

Биопсия кожи с обычной окраской гематоксилин-эозином — клинический диагностический метод при многих новообразованиях кожи, которые невозможно диагностировать визуально. Она также эффективна при воспалительных заболеваниях, особенно в тех случаях, когда специфический диагноз трудно поставить по клинической картине, данным анализов крови или соскобов кожи. Материал, полученный при биопсии, исследуют методами иммунофлюоресценции и электронной микроскопии, подвергают специальной окраске, культуральному анализу.

В каких случаях показана " бритвенная" биопсия? Выбор метода биопсии требует знания базовой дерматологии, т.е. понимания того, где вероятнее всего локализован очаг патологии. Бритвенная биопсия, как правило, является самой поверхностной из биопсий и особенно ценна, когда поражен эпидермис или зона, прилегающая к нему. Этот метод чаще всего используют при исследовании образований, имеющих ножку, папулезных и других поражений, возвышающихся над поверхностью кожи и особенно при диагностике базально-клеточной и плоскоклеточиой карциномы, себорейиого кератоза, бородавок, иитрадермальиого невуса и пиогенной гранулемы.

При большинстве воспалительных заболеваний подобный метод биопсии малоэффективен.

Каковы показания для пункционных биопсий? При пункционной биопсии круглым ножом вырезается участок кожи, включая эпидермис, дерму и необходимое количество подкожной жировой клетчатки, в виде цилиндра.

Хотя при пункционной биопсии можно захватывать участок ткани от 2 до 10 мм в диаметре, обычно его диаметр составляет 4 мм.

При необходимости проведения дополнительно культуральных и других исследований наиболее приемлемый диаметр пробы — 6 мм.

Изготовление срезов предпочтительнее начинать со стороны дермы, чтобы по возможности избежать артефактов от сдавливания ткани.

Пункционная биопсия с диаметром в 6 мм полезна при диагностике грибовидного микоза, Т- клеточной лимфомы кожи и в случаях, когда необходимо получить достаточное число фолликулов в биоптате с волосистой части головы.

В связи с имеющейся возможностью относительно легкого изменения направления пункционной биопсии (обычно на 3—4 мм) она является методом выбора при последующем проведении иммунофлюоресцентного анализа.

Образовавшийся дефект ткани можно оставить для спонтанного заживления, однако большинство дерматологов закрывают дефект одним швом.

Каковы показания для эксцизионной и инцизионной биопсии? Эксцизионная и инцизионная биопсия отличается от пункционной биопсии большей глубиной и овальной формой удаляемого кусочка ткани.

Эксцизионная биопсия включает полное (до уровня подкожного жира) удаление патологического образования с последующим послойным закрытием раны кожи. Способ особенно эффективен при полном удалении опухолей, таких, как злокачественная меланома, базально-клеточная и плоскоклеточная карцинома.

Эксцизионную биопсию производят, если предполагается, что после нее косметический эффект будет лучше, чем после пункционной.

Инцизионная биопсия — это неполное или частичное удаление патологического образования подкожного жира с последующим послойным ушиванием кожи. При подозрении на меланому, которая слишком велика, чтобы быть удаленной обычным хирургическим вмешательством, производится инцизионная биопсия с удалением самой толстой части меланомы для проведения диагностических исследований. Такой тип биопсии эффективен для диагностики панникулита, склеротических или атрофических поражений, при которых необходимо сравнить кожу в очаге поражения с кожей прилегающих нормальных участков (например, при склеродерме), а также в случаях поражений с активно расширяющимися границами, таких, как гангренозная пиодермия.

⇐ Предыдущая 1 234 Следующая ⇒