Работа № 8. Определение тиамина в поливитаминных препаратах.

Принцип метода основан на способности тиамина окисляться феррицианидом калия в щелочной среде в тиохром, который после экстракции из раствора бутиловым спиртом дает в ультрафиолетовых лучах сине-голубое окрашивание.

Ход работы. Драже из поливитаминов размять в ступке, добавить 30 мл 0, 1н раствор НСl и тщательно размешать. В 3 пробирки добавить:

1. Контроль - 5 мл 0, 1 н раствор НСl.

2. Опыт - 1 мл раствора витаминов + 4 мл дистиллированной воды.

3. Стандарт - 5 мл стандартного раствора тиамина.

Во все пробирки прилить по 1, 5 мл окислительной смеси (щелочного раствора феррицианида калия), осторожно встряхнуть до полного перемешивания, во все пробирки налить по 5 мл н-бутанола, интенсивно встряхивать в течение 5 минут. Подождать расслаивания жидкости. Все пробирки поместить в штатив флуороскопа и сравнить флуоресценцию раствора в 3-х пробирках.

Вывод:

Работа № 9. Определение рибофлавина в поливитаминных препаратах.

Принцип метода. Основан на способности рибофлавина давать в ультрафиолетовых лучах желто-зеленую флюоресценцию, интенсивность которой зависит от концентрации рибофлавина.

Ход работы. Экстракт готовится как в предыдущей работе.

В 3 пробирки добавить:

1. Контроль - 7 мл воды.

2. Опыт - 2 мл экстракта из драже + 5 мл воды.

3. Стандарт - 1 мл стандартного р-ра + 5 мл воды.

Поместить пробирки в штатив флуороскопа и сравнить флюоресценцию в 3-х пробирках.

Вывод:

Эталоны ответов к тестовым заданиям

Вид 1. 1.1.-г; 1.2-а; 1.3– а; 1.4-а.

Вид 2. 2.1. – 1-г; 2-а; 3-е; 4-д; 5-в; 6-б; 7-з; 8-ж; 9-к;

2.2. – 1-ж; 2-а; 3-г; 4-б; 5-е; 6-в; 7-д.

Вид 3. 3.1.-2, 4; 3.2-2, 4; 3.3-1, 2, 3.

Вид 4. 4.1. А (+, +, +); 4.2-С (+, -, -); 4.3-А (+, +, +).

Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1. Препараты витамина К используются как средства, предупреждающие кровотечения, поскольку витамин К относится к непрямым коагулянтам, участвующим в образовании в печени факторов свертывания II, VII, IX X. Участие заключается в g-карбоксилировании остатков глутаминовой кислоты в ходе постсинтетического «дозревания» белков свертывания крови. Дополнительная карбоксильная группа необходима для взаимодействия с ионами Са⁺⁺ (факторы II, VII, IX, X являются Са⁺⁺-зависимыми).

 

Задача 2. В основе ренального рахита лежит снижение способности вырабатывать активную форму витамина Д₃ – 1, 25-диоксихолекальциферол [1, 25(ОН)₂D₃], так как 1α -гидроксилирование протекает именно в ткани почек. Наиболее эффективным в данном случае является применение не самого холекальциферола, а его активного метаболита – [1, 25(ОН)₂D₃].

 

Задача 3. Токоферол относится к антиоксидантам фенольной природы, так как содержит в своей структуре фенольный фрагмент. Фенолы – активные антиоксиданты, поскольку после присоединения электрона образуют стабильный феноксильный радикал – своеобразную «ловушку» электронов. Аскорбиновая кислота, благодаря своим восстанавливающим свойствам, окисляясь, регенерирует восстановленную форму токоферола. Сам аскорбат регенерируется, взаимодействуя с глутатионом.

α -ферроксильный радикал	L-аскорбат
α -токоферол	L-аскорбильный радикал

Занятие № 3. Витамины и коферментные формы витаминов.

Количественное определение витаминов.

Цель занятия. Закрепить знания студентов по структуре, свойствам, био­логической роли витаминов. Овладеть некоторыми методами количественного определения витаминов в растительном материале.

В результате освоения темы занятия студент должен:

Знать:	Уметь:
1.Химическую структуру водорастворимых витаминов, имеющих коферментную форму. 2.Биохимические функции витаминов группы B. 3.Суточную потребность в отдельных витаминах и содержание их в пищевых продуктах. 4. Характерные признаки авитаминозов и гиповитаминозов, причины их возникновения.	1.Объяснить роль витаминов в обменных процессах. 2.Определять количественное содержание витамина C и P. 3.Оценивать пищевой рацион с точки зрения обеспеченности организма витаминами.

План занятия

1. Контроль выполнения задания по самоподготовке, ответы на тесты.

2. Рассмотрение узловых вопросов, решение ситуационных задач, заслушивание и обсуждение реферативных сообщений.

3. Выполнение лабораторной работы, оформление протоколов.

4. Контроль выполнения работы и усвоения темы.

 

УИРС. Определение содержания витамина С в моче и слюне у добровольцев.

 

Методические указания к самоподготовке

При подготовке к данному занятию необходимо вспомнить материал модуля «Ферменты» - иметь четкие представления о строении активного центра ферментов-протеидов. При изучении отдельных ви­таминов особое внимание следует уделять структуре коферментов, в состав которых входит витамин, механизмам участия этих кофермен­тов в каталитических реакциях и попытаться запоминать проявления дисбаланса витаминов как следствие нарушения соответствующих биохимических процессов. Для подготовки к занятию вам предстоит проштудировать довольно большой теоретический материал. Для систематизации ваших знаний попытайтесь запоминать информацию о витаминах в следующем порядке:

1. химическое, физиологическое название витамина, буквенный индекс;

2. химическая структура витамина, его активной формы или кофермента;

3. физико-химические свойства (окраска, растворимость);

4. суточная потребность, наиболее богатые пищевые источники витамина;

5. биохимические функции (конкретный биохимический процесс, в котором участвует витамин, если имеется - структура кофермента и типы катализируемых им реакций);

6. проявления дисбаланса витамина.

Для того, чтобы успешно подготовиться к данному занятию, выполните задания:

№№	Задание	Указания к выполнению задания
1.	Изучите общие вопросы о коферментах.	1. Какой ученый одним из первых указал на связь витаминов и коферментов? 2. Дайте определение понятию кофермент. 3. Приведите классификацию коферментов (нуклеотиды, протопорфирины и др.). 4. Каков характер связи между различными коферментами и апоферментами?
2.	Изучите водорастворимые витамины, имеющие коферментные формы.	1. Начертите в тетради и заполните следующую таблицу:
Витамин	РР В1 В2 В3 В6 В12 Н Фолацин
названия
Структура
Суточная потребность
Основные пищевые источники
Специфические названия авитаминоза
Название кофермента, содержащего витамин
Класс ферментов, содержащих данный кофермент
2. Начертите в тетради и заполните таблицу:
Название кофермента или простетической группы фермента.	Название витамина, входящего в кофермент	Характер групп, которые переносятся при участии
3. Напишите схему окислительно-восстановительных превращений коферментов НАД+ и ФАД. 4. Напишите реакцию образования кофермента ТДФ или ТПФ (тиаминкиназная реакция) и суммарное уравнение процесса декарбоксилирования ПВК и α -кетоглутарата.
5. Напишите реакцию образования коферментной формы фолиевой кислоты – тетрагидрофолата. Продемонстрируйте роль ТГФК как переносчика одноуглеродных групп: напишите структуры 5, 10-метилен-Н4-фолата, 5-метил-Н4-фолата, 10-формил-Н4-фолата. Напишите механизм процесса переаминирования аминокислот с участием пиридоксальфосфата.
6. Напишите структуру кофермента А. 7. Напишите реакцию образования карбоксибиотина. 8. Охарактеризуйте участие метилкобаламина и дезоксиаденозилкобаламина в обмене веществ.

Примеры тестов контроля исходного уровня знаний

Вид 1. Выберите один наиболее верный ответ.

1.1. При гипервитаминозе наиболее токсичен ….

а) витамин Д б) витамин С в) витамин В₁ г) витамин В₆

 

1.2. Витамин В₁₂ ….

а) не имеет коферментных форм

б) вовлечен в перенос аминогрупп

в) требует специфического гликопротеида для всасывания

г) в больших количествах присутствует в растительной пище

 

Вид 2. Установите соответствие.

2.1. Фермент – кофермент – функция.

B1 B2 B3 B6 Bc PP   H B12

а) TГФК б) НАД+, НАДФ+ в) ФАД, ФМН г) ТПФ (ТДФ) д) KoA е) пиридоксаль- фосфат ж) кобаламин з) биотин

a. трансаминирование и дезаминирование аминокислот b. окислительное декарбоксилирование a-кетокислот c. переносчик одноуглеродных групп d. переносчик ацила e. перенос электронов f. реакции карбоксилирования g. перенос метильных групп и внутримолекулярный перенос водорода

2.2. Витамин – антивитамин.

1. витамин В₆ а) дикумарол

2. витамин В₁ б) изониазид

3. витамин К в) варфарин

4. витамин В₂ г) тромексан

5. фолиевая кислота д) аминоптерин, метотрексат

6. парааминобензойная е) окситиамин

кислота ж) акрихин

з) сульфаниламиды

2.3. Витамин-проявление недостаточности или авитаминоза.

1. витамин В₆ а) дерматит, диарея, деменция

2. витамин РР б) кровоточивость десен, расшатывание зубов

3. витамин С в) сердечная недостаточность, периферические невриты

4. витамин В₁ г) макроцитарная анемия

5. витамин В₂ д) себорея, дерматит

6. витамин Н е) катаракта, заеды в уголках рта

 

2.4. Кофермент – класс фермента

1. НАД, НАДФ а) лиазы

2. ФМН, ФАД б) оксидоредуктазы

3. ТПФ в) трансферазы

4. ТГФК г) изомеразы

5. кобаламин

6. пиридоксальфосфат

 

Вид 3. 3.1.Кофермент витамина В₆ пиридоксальфосфат участвует в ….

1. переносе аминогрупп с амино- на кетокислоту

2. окислительном дезаминировании аминокислот

3. декарбоксилировании аминоксилот

4. восстановительном аминировании аминокислот

5. транспорте аминокислот

 

3.2. Пернициозная анемии…

1. вызывается недостаточным поступлением витамина В₁₂ с пищей

2. сопровождается выработкой антител к париетальным клеткам желудка

3. сопровождается нарушением гемопоэза вследствие гиперпродукции специфического гликопротеида

4. сопровождается недостатком в желудочном соке НСl и пепсина

 

Вид 4. Определение правильности утверждений в предложении и установление наличия причинной связи между ними.

4.1. Отсутствие в пище триптофана способствует развитию гиповитаминоза РР, потому что небольшая часть витамина РР в организме синтезируется из триптофана.

 

4.2. Авитаминоз В₁ сопровождается метаболическим ацидозом, потому что дефицит тиамина приводит к накоплению в организме a-кетокислот – пировиноградной и a-кетоглутаровой.

 

Примеры ситуационных задач

Задача 1. Одним из главных проявлений недостаточности фолиевой кислоты является развитие макроцитарной анемии. Объясните механизм возникновения анемии при дефиците фолацина. Какое применение в медицине нашли антагонисты фолиевой кислоты?

Задача 2. Такие проявления недостаточности витамина С как расшатывание зубов, поражение сосудов, приводящее к кровоизлияниям, кровотечениям, являются последствием нарушения синтеза основного белка соединительной ткани – коллагена. В чем заключается участие аскорбиновой кислоты в синтезе коллагена? Какие природные соединения проявляют синергизм с аскорбиновой кислотой в отношении влияния на состояние соединительной ткани?

 

Задача 3. Больной В., 50 лет, поступил в клинику с жалобами на потерю аппетита, потерю веса, слабость, боли в области желудка. При лабораторном исследовании обнаружены следующие отклонения от нормы:

эритроциты в крови 1, 7 · 10¹²/л ( норма - 5 · 10¹²/л);

желудочная секреция 0, 4 л за сутки ( норма - 2, 5 л за сутки);

рН желудочного сока 7, 0 (норма - 1, 5).

Эритроциты имеют необычную форму и большие размеры (диаметр 12-14 мкм при норме 7-8 мкм). Диагноз? Как помочь больному?

Самостоятельная работа студентов

⇐ Предыдущая6789101112131415Следующая ⇒

Поделиться:

Популярное:

1. D триггеры, работающие по фронту.
2. I. Техники безопасности при подготовительных работах.
3. II – Предопределение, избрание и свобода воли
4. II. Работа со словарём. Научитесь одним движением руки открывать нужную букву в словаре.
5. IХ.Определение рыночной стоимости затратным подходом
6. А - типовые, разработанные в СоюзДорПроекте; б - из стеклофибробетона
7. А.1 Определение условий выполнения проекта
8. Акушерство: работа с младенцами и детьми
9. АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ ПРОРАЩИВАНИЯ СЕМЯН. Заполнение документов на анализ семян. определение жизнеспособности семян хвойных пород методом йодистого окрашивания
10. Анализ электрокардиограммы: определение интервалов, зубцов, положения электрической оси сердца в грудной клетке.
11. Атрофия: 1) определение и классификация 2) причины физиологической и патологической атрофии 3) морфология общей атрофии 4) виды и морфология местной атрофии 5) значение и исходы атрофии.
12. Библейское определение покаяния