Определение группы крови системы АВ0 моноклональными антителами

Подготовить:

сухое предметное стекло (типовую тарелочку) для определения группы крови;
цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета);
две пипетки для взятия цоликлонов из флаконов;
две стеклянные палочки для смешивания крови пациентки с цоликлонами;
одноразовый шприц (на 5-10 мл) с иглой для взятия крови из вены пациентки;
в стерильный лоток положить 3 шарика, смоченных спиртом, 2-3 стерильные салфетки;
резиновый жгут для внутривенных пункций;
сухую центрифужную пробирку, на которой стеклографом отчетливо подписать фамилию пациентки;
бланк - направление в лабораторию, где врачом - лаборантом повторно определяется группа крови, резус принадлежность, ставится печать и подпись

Соблюдая все правила для внутривенных пункций, произвести забор крови из вены пациентки (не менее 5 мл).

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пластинку по одной большой капле (0, 1) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В.
Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0, 01 мл).
После смешивания реагентов и крови разными стеклянными палочками для анти-А и анти-В в соотношении 1: 10 за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2, 5 мин.
Чтение результатов через 5 минут при помешивании капель. (от 3-х до 5 минут)
Результат оценивается врачом. Оценка результатов реакции агглютинации с Цоликлонами анти-А и анти-В представлена в таблице, в которую также включены результаты определения агглютининов сыворотке (плазме) доноров с помощью стандартных эритроцитов.

Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами	Исследуемая кровь принадлежит к группе
анти-А	анти-В
–	–	0(I)
+	–	A(II)
–	+	B(III)
+	+	AB(IV)

С целью исключения аутоагглютинации, которая может наблюдаться в пуповинной крови новорожденных, в случае установления группы крови АВ(IV) необходимо произвести контрольное исследование: одну каплю (0, 1 мл) изотонического раствора хлористого натрия смешать с маленькой каплей (0, 01 мл) исследуемой крови. Реакция агглютинации должна ОТСУТСТВОВАТЬ.

А. Внимательно заполнить все графы бланка - направления в лабораторию для определения группы крови и резус принадлежности с подписью врача.

В. Доставить бланк-направление и пробирку с кровью пациентки в лабораторию для тщательного определения группы крови и резус принадлежности пациентки.

Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (Цоликлон анти-D Супер)

На тарелку наносят большую каплю реагента (около 0, 1 мл). Рядом помещают маленькую каплю (0, 01-0, 05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом. Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 сек, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 сек. (резус положительная, нет агглютинации – резус отрицательная). Результаты реакции учитывают через 3 мин.

Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 сек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Экспресс-определение групп крови АВО и резус с использованием набора " Эритротест-группокарт"

Набор " Эритротест-группокарт" (ООО " Гематолог", Москва) предназначен для определения АВО и Резус (RhD) групп крови человека в лабораторных и полевых условиях. Определение проводится в реакции прямой гемагглютинации и не требует никаких вспомогательных реактивов и оборудования. В состав набора входят:

карточка " Эритротест-группокарт";
пипетка с дозированным объемом капли около 0, 02 мл;
стерильно упакованный скарификатор;
палочка для смешивания крови с реагентом.

В лунках карточки находятся высушенные моноклональные реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ и анти-D, которые немедленно растворяются при добавлении воды. Моноклональные анти-D-антитела специфично выявляют антиген RhD независимо от группы АВО. В последней лунке находится растворитель для постановки контроля на неспецифическую аутоагглютинацию.

Ход определения:

Определение производят в нативной крови с консервантом, в крови без консерванта или крови, взятой из пальца.

Вскрывают упаковку и достают карточку, не дотрагиваясь до лунок с рабочей поверхностью. Вписывают данные пациента, кроме группы крови.
В каждую лунку вносят 1 каплю воды (водопроводной или дистиллированной), используя вложенную в набор пипетку. Воду наносят на пятно высушенного реагента. Нельзя допускать подсыхания капли.
Вносят в каждую лунку маленькую каплю исследуемой крови. Кровь наносят рядом с каплей реагента, не касаясь его, чтобы избежать загрязнения одного реагента другим. Для взятия крови из пальца используют стерильный скарификатор.
Тщательно смешивают кровь с реагентом с помощью палочки, вложенной в набор. В каждой лунке смешивание производят только новой палочкой. Использование одной палочки для перемешивания в разных лунках не допустимо, т. к. ведет к загрязнению реагентов и ошибочному определению группы крови.
Сразу покачивают пластинку. Четкая агглютинация наступает через 10-30 с, однако окончательный результат следует учитывать через 3 мин, т.к. в случае слабых форм антигена А реакция наступает позднее, а агглютинаты мельче.
Результат оценивают визуально (табл. 18.6). В квадраты под каждой лункой вписывают результат реакции с соответствующим реагентом (+ или -).

Таблица 18.6. Результаты реакции в наборе " Эритротест-группокарт" и группа крови
Анти-А	Анти-В	Анти-АВ	Анти-О	Группа крови
–	–	–	–	0(I) Rh - отриц.
–	–	–	+	0(I) Rh - полож.
+	–	+	–	А(II) Rh - отриц.
+	–	+	+	А(II) Rh - полож.
–	+	+	–	В(III) Rh - отриц.
–	+	+	+	В(III) Rh - полож.
+	+	+	–	АВ(IV)Rh - отриц.
+	+	+	+	АВ(IV) Rh - полож.

Вписывают группу крови. Заключение о группе крови можно делать только в случае отсутствия реакции в контроле (последняя лунка).
Отрезают по линии лунки с кровью, а карточку сохраняют.

Срок хранения набора " Эритротест-группокарт" - 2 года при температуре 2- 8°С. Допускается хранение в течение 1 года без холодильника, если температура не превышает 25°С. Хранение и использование незапаянных или поврежденных пакетов не допускается.

Гемотрансфузионный шок

Симптомы Гемотрансфузионного шока:

Признаки гемотрансфузионного шока:

1) возбуждение больных;

2) боли в груди;

Боли в пояснице.

Затем развиваются:

4) бледность кожных покровов;

5) тахикардия;
6) холодный пот;

Стойкое падение АД.

В более поздние сроки развиваются:

8) гемоглобинемия;

9) гемолитическая желтуха;

10) ОПН;

Острая печеночная недостаточность.

Если шок развивается во время операции, под наркозом, то его признаками являются:
1) стойкое падение АД,

2) повышенная кровоточивость из операционной раны,
3) появление мочи цвета " мясных помоев" (поэтому в случаях переливания крови во время операции обязательна катетеризация мочевого пузыря).

Степени гемотрансфузионного шока:

1 степень - снижение систолического артериального давления до 90 мм рт. ст.; 2 степень - до 80-70 мм рт. ст.; 3 степень - ниже 70 мм рт. ст.

Периоды гемотрансфузионного шока:

1) собственно гемотрансфузионный шок;

2) период олигурии и анурии;

3) период восстановления диуреза;

Период выздоровления.

Клинические симптомы шока

Больной проявляет беспокойство, жалуется на боли и чувство стеснения за грудиной, боли в пояснице, мышцах, иногда озноб, наблюдается одышка, затруднение дыхания; лицо гиперемировано, иногда бледное или цианотичное. Возможны тошнота, рвота, непроизвольные мочеиспускание и дефекация. Пульс частый, слабого наполнения, артериальное давление снижается.

Клиника под наркозом:

При переливании несовместимой крови во время операции под наркозом проявления шока чаще отсутствуют или слабо выражены. В таких случаях на несовместимость крови указывают повышение или падение артериального давления, цианоз кожного покрова и видимых слизистых оболочек, повышенная, иногда значительно, кровоточивость тканей в операционной ране.

Гемотрансфузионные реакции и осложнения классифицируются:

I. Иммунные:

- несовместимость по АВО, Rh, HLA - гемолитические реакции;

- фебрильные - HLA;

- анафилактические - IgA;

- аллергические - белки плазмы;

- синдром массивных гемотрансфузий.

II. Неиммунные:

- недоброкачественная кровь;

- инфицированная кровь;

- погрешности в технике переливания;

- состояние реципиента.

Причины Гемотрансфузионного шока:

Гемотрансфузионный шок возникает при переливании крови, эритроцитарной массы, несовместимых по групповой системе АВО. Проявляется во время или в ближайший час после гемотрансфузии в виде падения артериального давления, появления мочи темно-бурого цвета и олигоанурии, озноба, болей в области поясницы, одышки, желтухи.

Причина - в большинстве случаев невыполнение правил переливания крови на одном из этапов. Патогенез: внутрисосудистое разрушение эритроцитов донорской крови приводит к выходу в кровь свободного гемоглобина, активного тромбопластина, что приводит к ДВС - синдрому, нарушению микроциркуляции, ЦНС, шоку.

Первая медицинская доврачебная помощь при инфузионных, (трансфузионных) осложнениях

Показания: осложнения при гемотрансфузиях.

Материальное обеспечение:

⇐ Предыдущая 26 27 28 29 303132 33 34 35 Следующая ⇒