Тематика лабораторных занятий. Тема 1 «Биоматериал, порядок отправки его в лабораторию». Содержание лабораторных занятий

Тематика лабораторных занятий по дисциплине «Ветеринарная микробиология и микология» представлена в таблице 1.

Таблица 1 – Тематика лабораторных занятий

№пп	Название разделов дисциплины	Тема занятия	Трудоемкость (часов)
1	Общая микробиология	1.1 Бактериологическая лаборатория. Иммерсионная система микроскопа.	2
		1.2 Приготовление и окрашивание бактериальных препаратов.	2
		1.3 Специальные методы окраски бактерий. Определение подвижности бактерий.	2
		1.4 Методы изучения морфологии грибов и дрожжей.	2
		1.5 Стерилизация. Питательные среды.	2
		1.6 Методы культивирования и выделения чистых культур микроорганизмов.	4
		1.7 Методы изучения культуральных и биохимических свойств бактерий.	2
		1.8 Изучение антибиотикочуствительности бактерий. Бактериофаги.	2
2	Основы учения об инфекции и иммунологии	2.1 Инфекция и иммунитет	2
3	Частная микробиология и микология	3.1 Биоматериал, порядок отправки его в лабораторию.	2
		3.2 Реакция агглютинации. Реакция преципитации.	2
		3.3 Реакция связывания комплемента. Реакция иммунофлуоресценции.	2
		3.4 ДНК-ДНК гибридизация, ПЦР	2
		3.5 Лабораторная диагностика стафилококкозов и стрептококкозов.	2
		3.6 Лабораторная диагностика рожи свиней и листериоза.	2
		3.7 Лабораторная диагностика сибирской язвы.	2
		3.8 Лабораторная диагностика колибактериоза и сальмонеллезов	2
		3.9 Лабораторная диагностика анаэробных инфекций.	2
		3.10 Лабораторная диагностика туберкулеза.	2
		3.11 Лабораторная диагностика бруцеллеза.	2
		3.12 Лабораторная диагностика лептоспироза.	2
		3.13 Лабораторная диагностика дерматомикозов.	2
4	Санитарная микробиология	4.1 Санитарно – бактериологическое исследование воды и воздуха.	4
		4.2 Санитарно – бактериологическое исследование кормов.	2
		4.3 Санитарно – бактериологическое исследование молока.	2
	ИТОГО:		54

Содержание лабораторных занятий

Тема 1 «Биоматериал, порядок отправки его в лабораторию»

Цель – формирование знаний о правилах отбора, консервирования, транспортирования патологического материала от животных в лабораторию, навыков работы с источниками информации, с биоматериалами от больных и инфицированных животных, умений оформления сопроводительных документов.

План

1. Взятие и пересылка патологического материала.

2. Сопроводительная документация.

Материальное обеспечение: образцы патологического материала (паренхиматозные органы, лимфатические узлы, трубчатая кость, кровь, сыворотка крови, содержимое абсцессов), стерильная посуда, пакеты, инструменты для отбора проб, нормативная документация, пробирки со стерильным физ. раствором, консервирующие средства, спиртовки, Ветеринарное Законодательство том II, 1972 года издания.

Теоретический материал

Правила взятия патологического материала, крови, кормов и пересылки их для лабораторного исследования изложены в Ветеринарном Законодательстве том II, 1972 года издания на странице 155. Во всех случаях взятия и пересылки материала специалист обязан руководствоваться изложенными ниже правилами, а также соответствующими инструкциями по борьбе с болезнями животных.

Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и

вирусологического исследований

Патологический материал необходимо брать стерильными инструментами в стерильную посуду. Поверхность органа (ткани), от которого берут патологический материал, на месте разреза следует обжечь над пламенем или прижечь нагретой металлической пластинкой.

Патологический материал должен быть взят как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года, т.к. сразу же после заболевания (или впервые же 1-2 дня) барьерная роль кишечника значительно ослабевает, что наряду с повышенной проницаемостью кровеносных сосудов способствует диссиминации кишечной флоры.

Кроме того, по мере углубления инфекционного процесса количество вируса может снижаться в результате одновременного воздействия защитных сил организма.

Следует учитывать, что при многих вирусных инфекциях наблюдается феномен посмертной аутостерилизации, в результате чего вирус может быть вообще не обнаружен или его количество окажется очень незначительным.

Вторая причина необходимости экстренного взятия материала – избежать посмертных изменений в тканях, иначе они могут оказаться непригодными для бактериологических и вирусологических исследований.

Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни:

· от больных с выраженной клиникой с указанием температуры, частоты пульса и дыхания (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);

· от убитых в агонии (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);

· от выздоравливающих животных (кровь).

Взятые пробы следует как можно быстрее поместить в условия, обеспечивающие замедление процессов разложения материала. Такие условия обеспечивают низкие температуры.

Если патологический материал невозможно доставить в лабораторию в течение ближайших 24-30 часов, его посылают только в консервированном виде.

Патологический материал (органы или их части) консервируют 30-50%-ным раствором химически чистого глицерина на физиологическом растворе. Физиологический раствор предварительно стерилизуют при 120⁰С в течение 30 мин.

Материал можно консервировать также в стерильном вазелиновом масле. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве 4-5 раз, превышающем его объем. Консервированные образцы желательно хранить в холодильнике.

Небольшие трупы (поросят, мелких животных можно посылать целиком во влагонепроницаемой таре).

Трубчатые кости посылают на исследование в целом виде, очищенными от мышц и сухожилий. Кости завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей жидкостью и пересылают в сейф - пакетах или в стерильных полиэтиленовых пакетах.

Кишечник перед посылкой для бактериологического и вирусологического исследований освобождают от фекальных масс, а концы кишечника перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями.

Кишечник помещают в банки с 30%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором поваренной соли. Объем консервирующей жидкости должен превышать объем взятого материала в 4-5 раз.

Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках, банках, которые закрывают пергаментной бумагой, пробками или в контейнерах.

Кал от трупов животных можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов, он должен быть доставлен в лабораторию не позднее 24 ч после его взятия.

Для исследования участков кожи берут наиболее пораженные ее кусочки размером 10x10 см и посылают в стерильной, герметически закупоренной посуде.

При взятии содержимого гигром (бурс) в области поражения выстригают шерсть, кожный покров дезинфицируют 70°-ным спиртом и обрабатывают 5%-ной настойкой йода. Затем стерильным шприцем с иглой большого диаметра делают пункцию, отсасывают содержимое гигромы и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.

Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Из каждой доли вымени берут последние порции молока по 10-15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.

У овец и коз пробы молока берут с помощью молочного катетера или путем пункции цистерны вымени. Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска протирают 70%-ным спиртом или смазывают 5%-ной настойкой йода. Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска. После попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.

Пробы мочи берут катетером в стерильную посуду. При его отсутствии мочу получают при естественном мочеиспускании или, вызывая последнее, раздражением наружных половых органов.

Пробы слизи из половых органов животных берут стерильным марлевым тампонам при помощи специальных инструментов конструкции Павловского, Жавордова, Казеева, а также применяемых при искусственном осеменении коров шприца-катетера или полистироловой пипетки, соединенной со шприцем.

Для получения смывов слизистой оболочки носовой полости, половых органов, конъюнктивы и др. полость орошают стерильным физиологическим раствором или солевым раствором Хенкса (см. приложение) и собирают стекающий раствор в емкости.

Иногда для получения смывов в полость вводят стерильный ватный тампон, смоченный физиологическим или солевым сбалансированным раствором. Тампоном тщательно протирают слизистую, извлекают его и помещают во флаконы с аналогичным раствором.

Мазки из носа, полости рта, прямой кишки, клоаки у птиц и т.д. берут при помощи стерильных ватных тампонов на довольно длинных стерильных деревянных палочках. После взятия мазка тампон помещают в пробирку, заполненную соответствующей жидкостью.

Наиболее часто для этого используют реактив Хенкса с антибиотиками (пенициллин, стрептомицин, нистатин) и белковым стабилизатором, например с 0,5% желатина или 0,5-1% альбумина бычьей сыворотки.

Упаковка и пересылка патологического материала

Трупы мелких животных, части трупов животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным.

Посылаемый материал должен быть тщательно упакован, чтобы предупредить возможность рассеивания инфекции в пути.

Упаковка должна быть трехслойной:

1) емкость, содержащая пробу, должна быть водонепроницаемой, а в случае использования подвижных буферных растворов - герметичной;

2) внутренняя упаковка должна быть водонепроницаемой с достаточным количеством поглощающего материала на случай утечки для впитывания всей жидкости, содержащейся в пробе (вата, бумага);

3) наружная упаковка предназначена для защиты внутренней от физических повреждений и воды (герметичный термоконтейнер).

При перевозке наиболее надежным способом консервирования вируссодержащих проб является их замораживание. При транспортировке проб на дальние расстояния следует использовать сухой лед. В качестве емкости для материала и льда используют пластмассовые контейнеры, легкие по массе, с хорошей теплоизоляцией, небьющиеся и прочные.

Следует избегать колебаний температуры, особенно резких ее перепадов, а также повторных замораживаний и оттаиваний. Температура является определяющим фактором, влияющим на выживаемость вируса во время перевозки. Титр вируса снижается очень быстро, если температура среды, в которой его транспортируют, поднимается выше 20⁰С; у большинства вирусов это снижение происходит настолько быстро, что превращает последующее выделение вируса в пустую трату времени.

Если замораживание невозможно, то следует использовать один из следующих консервирующих растворов.

Кроме правильно выбранного материала, взятого в подходящие сроки и пересланного с соблюдением необходимых условий, лаборатория нуждается в определенной информации, касающейся больного и диагностических проб. Вместе с пробами направлять подробное описание динамики заболевания животного (время появления, быстрота охвата, процент заболеваемости, наличие летальных исходов или тяжелых осложнений, период переболевания, клиническая картина, протокол вскрытия, чем лечили, прививали).

На взятый материал составляют сопроводительный документ. В Ветеринарном Законодательстве том II, 1972 года издания на страницах 178-180 представлены три формы сопроводительных документов – к патологическому материалу, к пробам крови, к пробам кожевенного сырья.

Если при вскрытии посылки в лаборатории обнаруживается несоответствие сопроводительному документу или порча патологического материала, то обязательно составляют акт, копию которого отправляют ветеринарному врачу, направлявшему материал в лабораторию.

Теоретический материал по теме занятия студенты конспектируют в тетрадь и выполняют практические задания.

Практическое задание 1: Освоить правила отбора проб патологического материала от животных для бактериологического исследования.

Этапы выполнения задания:

1 Определить и отобрать участок пораженных тканей, органов.

2 Подготовить пробы паренхиматозных органов, трубчатую кость для транспортировки в лабораторию.

3 Выбрать необходимый консервант и консервировать сыворотки крови животных для серологического исследования.

Практическое задание 2. Составить сопроводительный документ на патологический материал, используя Ветеринарное Законодательство.

1 Составить сопроводительный документ на пробы патологического материала от животных для бактериологического исследования при подозрении на кишечные инфекции.

2 Составить сопроводительный документ на пробы сыворотки крови для серологического исследования на бруцеллёз.

3 Составить сопроводительный документ на пробы кожевенного сырья для серологического исследования на сибирскую язву.

4 Отчитаться преподавателю о выполненной работе.

Вопросы и задания для контроля знаний. 1 Определите порядок и цель отбора проб патологического материала от животных. 2 Какие правила необходимо соблюдать при отборе, транспортировке и хранении проб патологического материала? 3 Какую информацию необходимо указать в сопроводительном документе на пробы материалов для микробиологического исследования? 4 Чем консервируют патологический материал, предназначенный для бактериологического исследования? 5 Чем консервируют патологический материал, предназначенный для вирусологического исследования? 6 Назовите способы консервирования патологического материала, обоснуйте их применение. 7 Поясните порядок составления сопроводительных документов на патологический материал. 8 Для чего необходимо указывать в сопроводительном документе к пробам крови дату вакцинации животных? 9 Какой патологический материал берут от трупов павших животных?

⇐ Предыдущая12345678910Следующая ⇒

Поделиться: