Функции на периферийном (районном) уровне

⇐ ПредыдущаяСтр 3 из 31Следующая ⇒

Технические функции:

· Подготовка мазков и их окрашивание по Циль-Нильсену

· Бактериоскопия мазков и учет результатов

· Внутренний контроль качества

Организационные функции:

· Прием проб и выдача результатов

· Уход за оборудованием

· Ведение лабораторного журнала (ТБ 04)

· Работа с реагентами и расходными материалами

Функции на промежуточном (областном, региональном) уровне

Все функции и обязанности периферийного уровня плюс:

Технические функции:

· Флюоресцентная микроскопия (не обязательно)

· Обработка и деконтаминация клинических проб

· Выделение культур МБТ и их идентификация

· Определение лекарственной чувствительности

· Идентификация других видов микобактерий (не МБТ)

· Подготовка реагентов и обеспечение ими периферийных лабораторий

Организационные функции:

· Обучение лабораторных специалистов, выполняющих бактериоскопию

· Оказание помощи сотрудникам периферийных лабораторий в выполнении бактериоскопии и контроль их работы

· Улучшение качества исследований и проведение профессионального тестирования по бактериоскопии для периферийных лабораторий

Функции на центральном (национальном) уровне

Все функции и обязанности промежуточного (областного и регионального) уровня плюс:

Организационные функции:

· Контроль технического состояния лабораторного оборудования и обеспечение его ремонта

· Подготовка и периодическое обновление методических рекомендаций по лабораторной диагностике ТБ

Управленческие функции:

· Обучение лабораторных специалистов промежуточного (областного и регионального) уровня

· Контроль качества бактериоскопических и культуральных исследований в лабораториях промежуточного уровня.

· Конроль качества ТЛЧ, проводимых в лабораториях промежуточного уровня

Исследования и эпидемиологический надзор:

· Организация эпиднадзора за первичной и приобретенной лекарственной устойчивостью МБТ

· Операционные исследования по проблемам лабораторной службы

Качество лабораторной службы зависит от объема исследований и численности персонала. Для эффективной работы по бактериоскопии максимальное количество мазков методом ЦН на 1 лаборанта не должно превышать 20 мазков в день. Профессионализм в чтении мазков по ЦН поддерживается просмотром по крайней мере 10 –15 мазков в неделю, минимум 2-3 в день. Одной лаборатории, охватывающей 100 тыс. населения, обычно достаточно для достижения этих целей - 2- 20 мазков в день.

Организация работы бактериоскопической лаборатории и использование оборудования

При размещении оборудования в лаборатории необходимо предусмотреть три отдельные секции:

1. хорошо освещенная секция для приготовления и для окрашивания мазков

2. секция для бактериоскопии

3. секция для регистрации и хранения препаратов

В лаборатории необходимо иметь:

- рабочие столы

- раковину для окрашивания мазков

- винтовой стул или табуретку

- шкаф для реактивов

3.2.1 Предметы, необходимые для приготовления мазков:

1. Контейнер для сбора мокроты

2. Бактериологическая петля диаметром 3 мм

3. Предметное стекло (обезжиренное и без царапин)

4. Маркировочный карандаш

5. Пинцет

6. Газовая горелка Бунзена или спиртовая

7. Металлическая банка для сжигания использованного материала

8. Флакон со спиртом и песком

3.2.2 Предметы, необходимые для окрашивания мазков:

1. Штатив для чистых предметных стекол

2. Пинцет

3. Штатив для высушивания окрашенных мазков

4. Карболовый фуксин

5. 3% раствор соляной кислоты или 25% серной кислоты

6. Раствор метиленового синего

7. Дистиллированная вода

8. Газовая горелка Бунзена или спиртовая

9. Фильтровальная бумага

10. Таймеры или песочные часы

3.2.3 Предметы, необходимые для исследования под микроскопом:

1. Бинокулярный микроскоп

2. Иммерсионное масло

3. Салфетки для очистки линз

4. Коробка для хранения мазков

5. Толуол или ксилол

6. Ручки с синими и красными чернилами

3.3 Приготовление мазков:

Мазки следует готовить одновременно по несколько штук (максимальное количество в одной серии – 12 мазков).

Все манипуляции по приготовлению мазков должны быть стандартизированы!

Инструкция по приготовлению мазков (по Циль-Нильсену) в Приложении.

Приготовление реактивов для окрашивания по Циль-Нильсену

Карболовый фуксин Циля

Насыщенный спиртовой раствор фуксина:

- Основной фуксин – 3, 0 г

- 96% этиловый спирт - 100 мл

- Растворите основной фуксин в спирте (раствор № 1)

Раствор фенола:

- Кристаллы фенола – 5, 0 г

- Дистиллированная вода 100мл

- Растворите кристаллы фенола в дистиллированной воде, может потребоваться легкое нагревание (раствор № 2)

Рабочие растворы

Смешать 10 мл раствора № 1 и 90 мл раствора № 2, перелить в темную бутыль. Написать на этикетке название раствора, дату приготовления и срок хранения.

Кристаллический фенол должен храниться в плотно закрытой посуде (флакон) в холодильнике.

Обесцвечивающий реактив

25, 0 % серная кислота

Налить 300 мл воды в литровую бутылку. Медленно добавить 100 мл серной кислоты, наливая ее по стенке бутылки. Смешать. Содержимое нагреется. Никогда не наливать воду в серную кислоту!

3, 0 % солянокислый спирт

Этиловый спирт 96% - 97 мл

Соляная кислота - 3 мл (наливать кислоту в спирт).

Докрашивающий раствор

0, 3% раствор метиленового синего

- Метиленовый синий - 0, 3 г;

- Дистиллированная вода -100 мл.

Исследование под микроскопом

Для исследования окрашенных мазков наиболее подходит бинокулярный микроскоп с иммерсионным объективом (X 100) и окуляром (Х 10).

3.5.1 Подготовка микроскопа к исследованию:

1. Снять чехол, осмотреть микроскоп, убедиться в целости оптической системы и протереть сухой салфеткой механические части микроскопа

2. Включить электропитание

3. Отрегулировать яркость света до получения желаемой интенсивности

4. Убедиться в том, что подготовленные для микроскопии окрашенные мазки хорошо высушены

5. С помощью вращения макровинта опустить предметный столик, максимально отдалив его от объектива

6. Поворотом револьверного устройства установить объектив с малым увеличением (10х или 20х) точно над конденсором

7. Поместить на столик предметное стекло так, чтобы мазок находился прямо под объективом; при этом обязательно убедиться, что мазок находится в верхней плоскости предметного стекла

8. Закрепить препарат на столике с помощью препаратодержателей

9. С помощью винтов, передвигающих поверхность столика с закрепленным на нем препаратом, выбрать участок мазка для просмотра

10. Отрегулировать межзрачковое расстояние таким образом, чтобы правое и левое изображение слились в одно

11. Глядя в окуляр, медленно вращая макровинт, поднять предметный столик с препаратом к объективу, добиваясь четкого изображения объекта в поле зрения с помощью объектива 10Х или 20Х

12. Поворотом револьвера вывести объектив 10х или 20х из хода лучей и сместить объективы так, чтобы стал свободным доступ к препарату

13. Капнуть на выбранный участок мазка одну каплю иммерсионного масла. Капля должна свободно упасть на стекло

14. Поворотом головки револьверного устройства установить объектив с увеличением Х 100 непосредственно над мазком

15. Объектив должен коснуться иммерсионнного масла и не касаться предметного стекла, чтобы не повредить линзу объектива или не разбить препарат

16. Глядя в окуляр, с помощью микровинтов произвести настройку на резкость. Во время выполнения этой манипуляции необходимо быть особенно внимательным и смещать винты на небольшой ход, не допуская бесконтрольно полного оборота винтов

17. В случае появления в поле зрения пузырьков воздуха операцию настройки (момент соприкосновения фронтальной линзы объектива с иммерсией) необходимо повторить

18. Исследовать мазок в соответствии с техникой чтения мазка (см. ниже)

19. После того, как мазок будет прочитан, повернуть револьвер так, чтобы сместить объектив Х 100, и убрать мазок со столика.

20. Протереть линзы объектива с помощью бумаги для очистки линз или равноценной тканью.

21. По окончании работы установить регулятор электрического напряжения на минимум и выключить электропитание.

22. Накрыть микроскоп непроницаемым для пыли чехлом

Техника чтения мазка

При микроскопировании следует просматривать не менее 100 полей зрения, чтобы дать количественную оценку препарату и обнаружить единичные микобактерии. В том случае, если результат такого исследования оказывается отрицательным, для подтверждения рекомендуется просмотреть все 300 полей зрения. При значительном количестве кислотоустойчивых микобактерий достаточно исследовать 20 - 50 полей зрения при окраске по Циль - Нильсену.

При микроскопическом исследовании препарата необходимо быть уверенным, что ни одно поле зрения препарата не просматривается повторно, поэтому рекомендуется просматривать препарат всегда по одной и той же схеме: три параллельные линии по длине препарата.

Просматривать препарат начинают с левого верхнего выбранного в мазке поля зрения, постепенно передвигаясь вдоль продольной оси препарата до конца мазка, и затем вновь опускаясь вниз и двигаясь в противоположном направлении и т.д., проходя все поля зрения до границы мазка (рисунок 1).

Рисунок 1. Линии просмотра мазка размером 1х2 см.

324 – порядковый номер из журнала ТБ 04; 2 – номер порции мокроты

По окончании микроскопического исследования предметное стекло следует освободить от препаратодержателя;

а) снять предметное стекло со столика микроскопа;

б) сверить номер на стекле и направлении ТБ 05 и записать результат микроскопии в журнале ТБ 04;

в) для удаления иммерсионного масла опустить мазок на несколько секунд в баночку с ксилолом, или в случае отсутствия ксилола, протереть мазок сухой салфеткой;

г) очищенный от иммерсионного масла мазок поместить в коробку для последующего хранения

Туберкулезные бактерии - маленькие красные палочки, слегка изогнутые, более или менее зернистые, изолированные, парами, группами, хорошо видны на голубом фоне мазка. Подсчитать количество кислотоустойчивых бактерий (КУБ) и записать результат.

Перед следующим мазком протереть иммерсионные линзы чистой салфеткой.

Результаты исследования

Число обнаруженных бактерий определяет тяжесть заболевания и опасность больного для окружающих. Следовательно, исследование должно быть не только качественным, но и количественным. Регистрация результатов с указанием числа обнаруженных КУБ проводится следующим образом:

Таблица 3 – Регистрация результатов микроскопического исследования

⇐ Предыдущая 1 234 5 6 7 8 9 10 Следующая ⇒