Изучение содержания каротиноидов в РМ и МЭ методом спектро-фотометрии в видимой области

⇐ ПредыдущаяСтр 6 из 7Следующая ⇒

Контроль над суммарным содержанием каротиноидов принято осуществлять с помощью спектрофотометрии, так как данные соединения имеют электронные спектры поглощения с максимумами при 422-428, 444-450 и 472-484 нм.

Растительные масла, наиболее богатые β -каротином (облепиховое и масло шиповника) имеют сходные спектры поглощения в диапазоне длин волн 400-500 нм с максимальным значением оптической плотности в этаноле при 450 нм (рис. 3) (что характерно для β -каротина).

Рис. 3. Спектр поглощения растворов масел облепихи, шиповника и β -каротина в спирте этиловом в диапазоне длин волн 400-500 нм.

Процесс рафинации масел приводит к разрушению большинства биологически активных веществ (как правило термо- и фото лабильных) в результате сложной многостадийной очистки. Следовательно, данные вещества попадают в масляные экстракты из исходного лекарственного растительного сырья. Этот факт также подтвержден нами, так как из исследуемых масляных экстрактах наибольшее содержание β -каротина обнаружено в масляном экстракте цветков календулы, что объясняется его значительным присутствием в лекарственном растительном сырье.

Содержание (3-каротина в маслах прямо пропорционально его количеству в исходном сырье. Установлено, что во время вегетации растений динамика содержания β -каротина сильно изменчива. По мере созревания плодов количество β -каротина увеличивается, а в перезревших плодах уменьшается; в мелкоплодных сортах оно ниже, чем в крупноплодных. Кроме того, содержание суммы каротиноидов в маслах также зависит от места районирования и сорта растения. Из литературных источников известно, что масло облепихи характеризуется чрезвычайно разнообразным составом каротиноидов (каротины, фитоксантины и лютеины) и их большим содержанием по сравнению с маслом плодов шиповника, что также подтверждено нами в результате эксперимента.

В производстве масляных экстрактов в качестве экстрагентов чаще всего используются рафинированные масла (подсолнечное, соевое, кукурузное, реже оливковое).

3.5.2. Идентификация р-каротина в растительных маслах с помощью разработанной методики ТСХ Выделение β -каротина из растительных масел

Для изучения возможности подготовки образцов растительных масел с целью идентификации в них основного каротиноида - β -каротина, был проведен ТСХ-анализ:

1) Растворов растительных масел в хлороформе в соотношении масло - растворитель (1: 5);

2) Растворов растительных масел в хлороформе в соотношении масло — растворитель (1: 2);

3) Спиртовых вытяжек из растительных масел, полученных методом простой экстракции в соотношении масло - безводный этанол (1: 5).

Этанол обладает избирательностью в отношении триглицеридов и токоферолов, из числа каротиноидов преимущественно экстрагируются окисленные формы — ксантофиллы, β -каротин извлекается слабо. Брать навески масла большей величины не рекомендуется, так как они трудно эмульгируются. Использовать такие приемы для концентрирования вытяжек, содержащих каротиноиды как реперколяция или упаривание экстракта до сухого остатка с последующим его растворением в минимальном количестве растворителя нецелесообразно, так как данные вещества весьма фото- и термолабильны. Смесь энергично встряхивали в течении пяти минут, добиваясь тонкого эмульгирования масла в этаноле, а затем оставляли на сутки в защищенном от света месте в плотно укупоренном виде в условиях холодильника. Спиртовой экстракт β -каротина отделяют от масла с помощью делительной воронки. Затем на хроматографическую пластинку наносили 10 мкл данной вытяжки, 5мкл раствора масла в хлороформе в соотношении масло — растворитель (1: 5), 10 мкл стандартного раствора β -каротина с содержанием 120 мг/мл и хроматографировали. Вид полученной хроматограммы представлен на рис. (4):

В маслах были идентифицированы зоны (3-каротина по характерному значению величины Rf очень маленького размера и слабой интенсивности. Дальнейшее увеличение объема наносимой пробы приводит к «эффекту нагрузки».

Следовательно, можно привести выводы из состоявшегося эксперимента:

1. Установлено, что растительные масла и масляные экстракты, полученные из одного вида ЛРС, отличаются друг от друга по содержанию БАВ, что связано с технологией производства;

2. Цветное число и количественное содержание суммы каротинойдов в растительных маслах на порядок выше по сравнению с таковым масляным экстрактом, полученных из ЛРС одного вида;

3. Полученные данные ТСХ-анализа свидетельствует о различии в каротинойдном составе исследуемых объектов.

⇐ Предыдущая 1 2 3 4 567 Следующая ⇒